詳細介紹
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉(zhuǎn)錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結(jié)果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因品系南瓜ZW20 PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
羥基纖維素(4000mpas)RECK (D8C7) Rabbit mAb2-氟磺酰
麥芽糖;淀粉糖Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb2-磺酰
ONX-0914 (PR-957)Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb炔聯(lián)
N-壬?;?N-甲基葡萄糖(MEGA9)Flotillin-2 (C42A3) Rabbit mAb間異酸酯
甲基纖維素(100000mPa.s)AMPA Receptor 3 (GluA 3) Antibody2-(三甲硅基)
甲基纖維素(4000 mPa.s)Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb三鈉
對基-β-D-吡喃半糖苷(PNPG)Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb2 , 二溴-5-甲基吡
D-核糖(標準品)Notch1 (C37C7) Rabbit mAb三氟磺酸銀
D-核糖Chk2 (1C12) Mouse mAb三氟肼鹽酸鹽
二硫蘇糖(DTT)Chk2 (1C12) Mouse mAb5-溴-2-氟
D(+)-松二糖Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (PE-Cy®7 Conjuga)氟肼鹽酸
D-果糖-1,6-二酸三鈉鹽GOT1 (E4A4O) Rabbit mAb2-氟-甲基-5-溴吡啶
海帶多糖;昆布糖 (來自褐藻類)S100A9 (D5O6O) Rabbit mAb (IHC Formulad)L-甘氨酸
胰酶(1:250),胰酶粉Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb巰基酸甲酯
木瓜蛋白酶(800u/mg)Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb2-氨基-5-甲酸
木瓜蛋白酶(2000u/mg)HA-Tag (6E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-煙酸
胰酶(1:2500)GST (26H1) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,二甲
胰酶(1:4500)Notch3 (8G5) Rat mAb2-巰基-5-甲基-1,3,噻二唑
轉(zhuǎn)基因品系南瓜ZW20 PCR試劑盒5g5g曙紅Y(水溶)Dihydrocapsaicin
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
試,表面活性, 環(huán)偶氮脒類引發(fā)VA044
25g5g曙紅BPhytochelatins
L-乳(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標準品 L-(+)-Lactic acid
標準品,中藥標準品, 構(gòu)樹A
100g25g天狼星紅BBMetallothionein
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus毛木耳 Auricularia polytricha
標準品,中藥標準品, 11羥基柳杉酚