化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1573 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 種屬來源 | 大鼠 |
詳細(xì)介紹
大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
商品貨號 | A01X1573 |
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 人輸卵管成纖維細(xì)胞 |
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A（CD266）重組兔單克隆抗體 | 辣根過氧化物標(biāo)記的磷化雌激受體α抗體 |
人食管纖維瘤細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的E3泛連接抗體 |
人肝癌細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 |
人肝癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的組氨三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 |
人肝纖維母細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的真核翻譯起始因子3H抗體 |
人胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移1A抗體 |
人上皮細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1抗體 |
人腸系膜動脈平滑肌細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的抵抗抗體 |
人結(jié)腸癌細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的蛋白磷激PKC/CPI-17抗體 |
人腹膜間皮細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的KB抑制蛋白激β抗體 |
人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞辣根過氧化物標(biāo)記的核基質(zhì)蛋白21抗體 |
人結(jié)腸間質(zhì)細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的整合α6抗體 |
人結(jié)腸上皮細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的富含嘌呤元件結(jié)合蛋白A抗體 |
人前列腺成纖維細(xì)胞 | 辣根過氧化物標(biāo)記的組蛋白H1家族X抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)