培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
RKI-1447是高效的ROCK1和ROCK2的小分子抑制劑,IC50值分別為14.5nM和6.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1342278-01-6 純度:98.05% 分子量:326.37 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
耐冷冷桿菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgGAnti-TNFRSF10A Antibody防御β127(DEFβ127)ELISA試劑盒
大馬勃生物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP1 Antibody防御β126(DEFβ126)ELISA試劑盒
巨型艾美耳球蟲Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFAIP8L2(TIPE-2) Antibody防御β125(DEFβ125)ELISA試劑盒
玫瑰單胞菌Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β124(DEFβ124)ELISA試劑盒
鐮刀菌(大豆根腐病菌)Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF10B Antibody防御β123(DEFβ123)ELISA試劑盒
蛹蟲草Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β121(DEFβ121)ELISA試劑盒
乳桿菌屬PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β119(DEFβ119)ELISA試劑盒
pAAV-RC5PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β118(DEFβ118)ELISA試劑盒
豬鏈球菌堿性磷(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β116(DEFβ116)ELISA試劑盒
布魯氏菌膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11A Antibody防御β115(DEFβ115)ELISA試劑盒
產(chǎn)克雷伯氏菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF11B Antibody防御β114(DEFβ114)ELISA試劑盒
纖細(xì)海勒蒙氏菌FITC標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13B Antibody防御β113(DEFβ113)ELISA試劑盒
軟帕氏孔菌羅丹明標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β112(DEFβ112)ELISA試劑盒
毛地黃殼針孢Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF13C Antibody防御β110(DEFβ110)ELISA試劑盒
楊奇青霉Cy5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103B(DEFβ103B)ELISA試劑盒
松口蘑Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMAnti-TNFRSF14 Antibody防御β103A(DEFβ103A)ELISA試劑盒
蛋白激C亞型G抗體Hyphomonasrosenbergii人體結(jié)腸癌組織提取物
磷酯3蛋白抗體Ohtaekwangiakoreensis人體脂肪組織提取物
Rho鳥甘轉(zhuǎn)運蛋白抗體壞死梭桿菌壞死亞種人體表皮組織提取物
中心粒周蛋白抗體谷棒狀桿菌(黃色短桿菌)人體胎兒真皮組織提取物
ROCK1和ROCK2小分子抑制劑(RKI-1447)氟化鈰
其他 三氟化鈰; 氟化亞鈰;氟化鈰(Ⅲ)
英文名稱: Cerium(III) fluoride
其他英文名稱: Cerium trifluoride;Cerous fluoride
產(chǎn)品規(guī)格: AR,99.9%
包裝:100克/500克
產(chǎn)品規(guī)格: 4N,99.99%
包裝:25克
CAS號:7758-88-5
CeF3=197.11
級別:AR
含量:≥99.9%
雜質(zhì):≤500ppm
級別:4N
含量:≥99.99%
痕量稀土雜質(zhì):≤200ppm
性狀:六方形結(jié)晶或粉末。幾乎不溶于水,但漸被水解。相對密度6.157。熔點1460℃。
用途:生化研究。炭電弧中增加光彩。
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