操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:PKC抑制劑(CGP60474)
英文名稱:CGP60474 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 CGP60474是ATP競(jìng)爭(zhēng)性PKC高度選擇性抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):164658-13-3 純度:99.22% 分子量:355.82 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
馬葡萄球菌腦腸肽28Anti-DGKB Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒
瑟氏泰勒蟲(盧氏株-2)咬合蛋白抗原Anti-DGKD Antibody人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌胚胎干關(guān)鍵蛋白抗原Anti-DGKE Antibody人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
糞腸球菌鳥脫羧抗原Anti-DGKI Antibody人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
大腸埃希菌小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原Anti-DGKH Antibody人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒
玫瑰庫(kù)克氏菌嗅球蛋白1多肽抗原Anti-DGKB Antibody人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒
杰丁畢赤酵母增食欲-A/欲激A抗原Anti-DGKZ Antibody人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒
季也蒙有孢漢遜酵母縮宮受體Anti-DHPS Antibody人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒
異常威克漢姆酵母食欲受體(多肽)Anti-DHPS Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種增殖潛能相關(guān)蛋白抗原Anti-DGKK Antibody人E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒
費(fèi)雷生枝霉p19ARF抑癌基因抗原Anti-DHRS11 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒
乳酒假絲酵母磷化絲裂原活化蛋白激p38抗原Anti-DHRS4 Antibody人嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒
大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗原Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
抗生鏈霉菌腫瘤抑制基因抗原(野生型P53)Anti-DHX8 Antibody人鼠嗜粒趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
糞腸球菌突變型P53抗原Anti-DIABLO Antibody人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
尖孢鐮刀菌野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原Anti-DIAPH2 Antibody人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
嘌呤ATP受體抗體匍枝根霉人前列腺增生細(xì)胞
磷脂酰肌激催化亞單位A抗體聚多曲霉(薩氏曲霉)人胚腎細(xì)胞
蛋白體激活因子PA28γ抗體鏈格孢小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
前列腺E2受體2抗體米根霉小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
PKC抑制劑(CGP60474)多酚氧化(菌菇)
其他酪;酥基;多聚酚氧化;兒茶酚氧化
英文名稱:Polyphenol oxidase
其他英文名稱:Tyrosinase from mushroom;Catechol Oxidase;Monophenol Monooxygenase;Monophenol, dihydroxyphenylalanine:oxygen oxidoreductase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,500u/mg
包裝:25KU/10U
CAS號(hào):9002-10-2
級(jí)別:BR
活力:≥500units/mg
活力定義:在含有L-二羥或兒茶酚和L-抗壞血的3ml反應(yīng)混合液中,在pH值6.5,25℃時(shí),每1min內(nèi)ΔA265變化為0.001為一個(gè)活單位
PH:6.0~7.0
產(chǎn)品描述:Polyphenol oxidase is a bifunctional,copper-containing oxidase having catecholase and cresolase activity.It is responsible for browning reactions through the phylogenetic scale.The enzyme has a molecular weight of 128KDa.
級(jí)別:BR
活力:≥300units/mg protein
活力定義:1 U will convert one micromole of phosphoenolpyruvate to pyruvate per minute at pH 7.2 and 30 °C
pH stability:5.0~10.0(37℃,20hr)
Optimum PH:7.5
Thermal stability:≤60℃(pH8.5, 20min)
Optimum temperature:80°C
Preparation instructions:The enzyme is reconstituted in 50mM Tris-HC1 buffer,pH8.5 for activity assay
級(jí)別:Purifide
分子量:237 kDa and exists as a tetramer of four equal subunits of molecular weight 57 kDa
活力:350~600 units/mg protein
活力定義:One unit will convert 1.0 μmole of phospho(enol)pyruvate to pyruvate per min at pH 7.6 at 37 °C
lactic dehydrogenase, creatine phosphokinase, phosphoglucomutase, and myokinase :<0.01%
Isoelectric Point: 7.6
PH(Optimal pH):7.5
溫度:25°C
分子量:237KDa
活力:≥200units/mg
活力定義:1 U will convert 1umol of phosphoenolpyruvate to pyruvate per minute at pH 7.6 and 37°C
性狀:粉末,由4個(gè)亞基(分子量5500)組成。長(zhǎng)鏈脂肪、乙酰、ATP和對(duì)活有抑制作用,1,6-二磷果糖有活化作用。
用途:生化研究。激一種參與糖酵解途徑第10步反應(yīng)的激,是一個(gè)別構(gòu)。它催化磷烯式轉(zhuǎn)化而成,同時(shí)使ADP磷化生成ATP
保存:-20℃