培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
本試劑盒可以用于TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照的制備,制備后的陽(yáng)性對(duì)照可以用于一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT135)的熒光,也可以用于顯色法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(YT137)的顯色檢測(cè)。DNase I可以剪切基因組DNA,使基因組DNA產(chǎn)生片段化(fragmentation)?;蚪M被片段化的細(xì)胞在用TUNEL法檢查時(shí)會(huì)呈陽(yáng)性染色。本試劑盒足夠制備10個(gè)陽(yáng)性對(duì)照。 |
試劑盒組份:
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl
注意事項(xiàng):需自備用于TUNEL檢測(cè)的組織切片、或培養(yǎng)細(xì)胞的片子。需自備TUNEL檢測(cè)試劑盒。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
心鈉肽(ANP)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ANP ELISA Kitα2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1包裝1g
心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CT-1 ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa試劑盒英文名稱(chēng):cTn-Ⅰ ELISA Kit肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝1g
心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)elisa試劑盒英文名稱(chēng):cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g
小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g
小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AFP-L2 ELISA Kit磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g
小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AFP-L1 ELISA Kit磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g
腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)elisa試劑盒英文名稱(chēng):AHCY ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
腺病毒IgG抗體(ADV IgG)elisa試劑盒英文名稱(chēng):ADV IgG ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝500g
纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa試劑盒英文名稱(chēng):TAFI ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g
纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝10MG
纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒英文名稱(chēng):PAP ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝1mg
纖連蛋白(FN)elisa試劑盒英文名稱(chēng):FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg
細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg
AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體白介素4(IL4)Osimertinib (AZD9291) is an oral, irreversible, and mutant-selective EGFR inhibi
TUNEL檢測(cè)陽(yáng)性對(duì)照制備試劑盒豬脫氧膽酸
其他 豬去氧膽酸;異去氧膽酸;二羥基膽烷酸;精去氧膽酸;3,6-二羥基膽烷酸;3α,6α-二羥-5β-膽烷酸;去氧豬膽酸
英文名稱(chēng): Hyodeoxycholic acid
其他英文名稱(chēng): 3alpha,6alpha-Dihydroxy-5beta-cholan-24-oic acid
產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%
包裝:10克/25克/100克
CAS號(hào):83-49-8
C24H40O4=392.57
級(jí)別:BR
含量:≥98%
熔點(diǎn):≥195℃
干燥失重:≤2.0%
熾灼殘?jiān)?/span>≤1.0%
性狀:粉末。
用途:生化研究。
保存:RT