詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Pirarubicin Hydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Pirarubicin鹽酸鹽是doxorubicin的類似物,是Topo II抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:95343-20-7 別名:THP Hydrochloride 純度:96.90% 分子量:664.1 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
綠色鏈霉菌平足蛋白抗原Anti-DNAJC5 Antibody人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒
鮑姆木層孔菌多囊腎蛋白1抗原Anti-DNAL1 Antibody人食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒
根霉多囊腎蛋白2抗體Anti-DNMT3B Antibody人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒
假單胞菌屬磷化蛋白激B抗原(絲磷化位點:473)Anti-DNMT3L Antibody人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒
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冷溫木拉克酵母乙肝病pre-X蛋白抗原(N端)Anti-DOK2 Antibody人6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒
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芬尼青霉脯羥化(多肽)Anti-DOK1 Antibody人心納(ANF)ELISA試劑盒
棒曲霉新型金屬基質(zhì)蛋白(抗原)Anti-DOK3 Antibody人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒
雅致放射毛霉脂聯(lián)受體-1(抗原)Anti-DOK2 Antibody人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌脂聯(lián)受體-2(抗原)Anti-DOK6 Antibody人精加壓(AVP)ELISA試劑盒
枝孢霉前列腺性磷抗原Anti-DOK4 Antibody人精加壓(AVP)ELISA試劑盒
貪噬菌屬前列腺性磷抗原(人)Anti-DOK7 Antibody人垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
卷枝毛霉P選擇抗原Anti-DP-1 Antibody人垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
黃色短桿菌*溶體膜糖蛋白抗原Anti-DPF2 Antibody人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒
解淀粉芽孢桿菌一種腫瘤抑制基因抗原(C端)Anti-DPF2 Antibody人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒
p53誘導蛋白3抗體土星漢遜酵母人肝膽管癌細胞
組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移CARM1抗體健強地霉人腎細胞腺癌細胞
蛋白甘露糖基轉(zhuǎn)移1抗體葡萄芽假絲酵母人肺鱗癌細胞
孕激受體膜相關元件抗體間型酒香酵母人舌鱗癌細胞
Topo II抑制劑(Pirarubicin鹽酸鹽)對硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷
其他4-硝基基-β-D-吡喃葡萄糖苷
英文名稱:PNPG
其他英文名稱:4-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside;p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包裝:1克/5克
CAS號:2492-87-7
C12H15NO8=301.25
級別:BR
含量:≥98.0%
比旋光度:-96~-117°(C=1 in water)
水分:≤10.0%
Free p-nitrophenol:≤0.01%
性狀:淡黃色粉末,熔點166~169 °C,溶于甲:100mg/ml
用途:生化研究。α-D-半乳糖苷(α-D-Galactosidase)的底物。結(jié)合到大腸桿菌乳糖蛋白載體上
保存:?20°C,保質(zhì)期3年