詳細介紹
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Monkey anti liver cell membrane antibody (LMA) ELISA Kit | FS-M5821 |
ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復性高,可靠性強
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術服務要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴。
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操作要點:
1)標本的采取和保存:可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本;
2)試劑的準備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。儀器準備為酶標儀。
7)結果判斷:分定性判定和定量判定。
Corticosterone皮質酮;腎上腺酮種屬: Streptomyces│castaneoglobosus栗色渾圓鏈霉菌
Glucocorticoid糖皮質激素種屬: Bacillus│lentus遲緩芽胞桿菌
種屬: Flammeovirga│arenaria砂火色桿菌
Enzyme of Bacillus布氏桿菌酶種屬: Microlunatus│parietisMicrolunatus parietis
Glutathione peroxidase谷胱甘肽過氧化物酶種屬: Aeromicrobium│fastidiosum苛求氣微菌
Alpha-enolaseα-烯醇化酶種屬: Oceanospirillum│multiglobuliferum多球大洋螺菌
enolase烯醇酶種屬: Marivita│geojedonensis巨濟島海命菌
cholecystokinin膽囊收縮素種屬: Pediococcus│cellicola酒窖片球菌
Ghrelin胃饑餓素種屬: Ganoderma Lucidum(Leysser:Fries)Karsten靈芝(紅芝,赤芝)(斜面)
corticotropin-releasing factor促腎上腺皮質激素釋放因子種屬: Streptococcus egui subsp.equi馬鏈球菌馬亞種
Noradrenaline去甲腎上腺素種屬: Actinoplanes│palleroniiActinoplanes palleronii
Hydroxyl free radical羥基自由基種屬: LysobacterdaejeonensisLysobacterdaejeonensis
mycoplasma支原體種屬: Neisseria│lactamica乳糖發(fā)酵奈瑟氏菌
Clostridium piliformis泰澤病原體種屬: CorynebacteriumdoosanenseCorynebacteriumdoosanense
Tox IgM antibody弓形蟲IgM抗體種屬: Williamsia│marianensisWilliamsia marianensis
猴抗肝細胞膜抗體ELISA檢測試劑盒大鼠維生素C(VC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA Kit,48T/96T注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(H-2Ⅲ)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA Kit,48T/96T注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/H-1Ⅲ)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa(Schroeter) Migula
兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA Kit,48T/96T用途: 與大豆共生固氮
人25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 2*96孔板
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA Kit,48T/96T 用途: 分類 2:研究
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。