詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:轉基因品系玉米MS 6染料法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
細菌甲羥戊酸(mevalonate)含量高效液相層析-質譜法定量 ZNF284 20 ul
通用性5-磷酸甲羥戊酸( mevalonate 5-phosphate)含量高效液相層析-質譜法定量 TYR(Tyrosinase) 300 ul
通用性5-焦磷酸甲羥戊酸(mevalonate 5-pyrophosphate)含量高效液相層析-質譜法定量 ZNF211 100 ul
細胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶比色法定量 ZNF287 250 ul
組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶比色法定量 ZNF215 250 ul
血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶比色法定量 ZNF3 250 ul
細胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)合成酶活性比色法定量 ZNF23 250 ul
組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)合成酶活性比色法定量 ZNF232 250 ul
血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)合成酶活性比色法定量 ZNF238 100 ul
細胞甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 ZNF253 250 ul
組織甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 ZNF24 250 ul
血液甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 ZNF251 250 ul
真菌/酵母甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 ZNF256 250 ul
植物甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 L1CAM(Neural cell adhesion molecule L1) 100 ul
細菌甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性定量 ZMAT2 100 ul
細胞磷酸甲羥戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)活性比色法定量 ZIC4 100 ul
轉基因品系玉米MS 6染料法qPCR試劑盒Pseudomonas│frederiksbergensis Andersen et al.分離基物: 楊樹林緣根系土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 30存儲條件: 定期移植法
巴西固氮螺菌種屬: Azospirillum brasilense提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 固氮培養(yǎng)基:KH2PO4 0.2 g,K2HPO4 0.8 g,MgSO4·7H2O 0.2 g,CaSO4·2H2O 0.1 g,FeCl3 微量,Na2MoO4·2H2O 微量,酵母提取物 0.5 g,甘露醇 20.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.2。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件: 30℃,好氧生長特性: 革蘭氏陰性、微好氧、固氮存儲條件: 2-8℃冷藏。液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Trichothecium│roseum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分解纖維素培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Penicillium│variabile分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Streptomyces│sp.分離基物: 表面土壤提供形式: 其他安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 分類學及微生物藥物學的研究培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 其他
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 啤酒菌。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
Vibrio│splendidus分離基物: 底層海(深20米)提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應用領域: potential antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)基: 467生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。