詳細(xì)介紹
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ELISA試劑盒優(yōu)點:
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,良好的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit | FS-P5773 |
ELISA試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
Protein Kinase C蛋白激酶C種屬: Absidia│coerulea藍(lán)色梨頭霉
myosin light chain kinase肌球蛋白輕鏈激酶種屬: Nocardia│iowensis艾阿華諾卡氏菌
muscle glycogen肌糖原種屬: Bacillus│mesentericus vulgatus馬鈴薯芽孢桿菌
Asprosin白脂素種屬: Nesterenkonia│lutea藤黃色涅斯特連科氏菌
Glutamic acid Receptor 1谷氨酸受體1種屬: Burkholderia│graminis草根圍伯克霍爾德氏菌
Glutamic acid Receptor 2谷氨酸受體2種屬: Jiangella│alba白色姜成林氏菌
N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 1N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR1種屬: Streptomyces│minutiscleroticus細(xì)小菌核鏈霉菌
N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2AN-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體A亞單位NR2種屬: Dyadobacter│psychrophilus嗜冷成對桿菌
N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2BN-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體B亞單位NR2種屬: Amycolatopsis│sulphurea硫黃色擬無枝酸菌
ITG αⅤβ1整合素αVβ1種屬: Enterococcusfaecium(Orla-Jensen1919)SchleiferandKilpper-B?lz尿腸球菌
Cholesterol in mice 7 alpha hydroxylase25羥基膽固醇7α-羥化酶種屬: Tessaracoccus│flavescens變黃四合球菌
27-Hydroxycholesterol27羥基膽固醇種屬: PatulibactermedicamentivoransPatulibactermedicamentivorans
Integrin Alpha 5整合素αV種屬: Streptomyces│geysiriensis噴泉鏈霉菌
Integrin β1整合素β1種屬: Cedeceadavisae戴氏西地西菌
Cytochrome P450細(xì)胞色素P450種屬: Tessaracoccus│lubricantis冷卻劑四合球菌
豬食欲素/阿立新BELISA檢測試劑盒人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Porcine rotavirus
大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
人內(nèi)毒素(ET)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Lichtheimia corymbifera
內(nèi)毒素(ET)ELISA Kit,48T/96T 用途: 分類
大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Nocardiopsis synnemataformans