PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒

PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒公司*的商品：細菌RNA提取試劑小駁骨（標準品）Human, Mouse, Rat
RNAin（非凍型RNA樣品保存液）小檗紅（標準品）Human, Mouse
總RNA提取試劑小檗(標準品)Human, Mouse
液體樣品RNA提取試劑小檗皮（標準品）Human, Mouse
RNA高效保存液小豆蔻明(標準品)Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

根據(jù)不同的實驗方案設(shè)計，可以用來檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導(dǎo)的細胞毒作用。

熒光染料PKH67是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。

在細胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2的熒光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次(1/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。

除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導(dǎo)分化情況；或?qū)擞浀募毎⑷塍w內(nèi)，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

PKH67標記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患?？梢愿焖?，更準確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。

PKH67/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。

PKH67標記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為502nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光，流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為647nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。

PKH67標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外，還可單染后用于細胞增殖檢測，或者用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。

儲存條件：-20℃避光保存。
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

Pregnenolone(標準品)英文名稱： 6-TG/ThioguanineCD9蛋白抗體包裝100g

Progesterone（標準品）英文名稱： 6-TG/ThioguanineCD23/FcεRII抗體包裝25g

Promestriene(標準品)英文名稱： All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD27抗體包裝500g

RNH-奧美沙坦酯雜質(zhì)（標準品）英文名稱： All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD30抗體包裝25g

Rosiglitazone HCL (標準品)英文名稱： BicalutamideCD43抗體包裝5g

Rosiglitazone Maleate（標準品）英文名稱： BicalutamideCD48抗體包裝1g

Rosiglitazone（標準品）英文名稱： Busulfan/MyleranCD44抗體包裝5g

Sitagliptin phosphate monoh...英文名稱： Busulfan/Myleran整合αX抗體包裝100g

Sivelestat sodium (標準品)英文名稱： Lomustine表面趨化因子受體5抗體包裝25g

Sorafenib tosylate（標準品）英文名稱： LomustineCD2抗體包裝25g

Stanozolol（標準品）英文名稱： Hydroxyurea/HydroxycarbamideC-肽抗體包裝5g

Tamoxifen Citrate （標準品）英文名稱： Hydroxyurea/Hydroxycarbamide鈣結(jié)合蛋白抗體包裝1g

Tetrabenazine(標準品)英文名稱： Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白抗體包裝5g

Toremifene Citrate（標準品）英文名稱： Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白單克隆抗體包裝100g

Triamcinolone Acetonide(標準品...英文名稱： Toremifene Citrate環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體包裝25g

產(chǎn)黑假交替單胞菌Pseudoalteromonas│nigrifaciens 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血管抑/血管穩(wěn)定蛋白試劑盒血竭;Cochinchinenin

: =ATCC35674資源名稱: 自養(yǎng)黃色桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,5-HT2A高效選擇性激動劑血管性血友病因子裂解試劑盒西貝母堿苷;Sipeimine-3β-D

耐熱克魯維酵母Kluyveromyces│thermotolerans 質(zhì)量規(guī)格：>99%血管舒緩激肽試劑盒繡球酚 ;Hydrangenol
PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒氧化釓

其他 三氧化二釓

英文名稱： Gadolinium(III)oxide

其他英文名稱： Gadolinia

產(chǎn)品規(guī)格： 3.5N

包　　裝： 5克/25克/100克/500克

CAS號：12064-62-9

Gd2O3=362.50

級別：3.5N

含量：≥99.95%

性狀：單斜結(jié)晶或粉末。有吸濕性,能從空氣中吸收水分及二氧化碳。溶于而形成鹽類,不溶于水。相對密度(d15)7.407。熔點2330℃。有刺激性

用途：生化研究。電子屏蔽。熒光材料。催化劑。絕緣陶瓷。高折射光學(xué)玻璃。電視磷光激活劑

保存：RT

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。