操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱:PDGFR抑制劑(AC710)
英文名稱:AC710 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 AC710是有效的PDGFR抑制劑,對(duì)FLT3,CSF1R,KIT,PDGFRα和PDGFRβ的Kd值分別為0.6,1.57,1,1.3,1.0。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1351522-04-7 純度:99.89% 分子量:562.7 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
釀酒酵母Bacillus megaterium
大豆慢生根瘤菌Bacillus pumilus
匍匐曲霉原變種Bacillus megaterium
吉林?jǐn)S孢酵母Bacillus cereus
鑲邊鏈霉菌Bacillus megaterium
釀酒酵母Bacillus megaterium
香菇Bacillus pumilus
pGEX-4T-1Paenibacillus sp.
膠孢Bacillus simplex
大奇異球菌Bacillus megaterium
沙福芽孢桿菌Bacillus atrophaeus
莖點(diǎn)霉Bacillus subtilis
墻壁圣格奧爾根菌Pseudomonas aeruginosa
巴氏醋桿菌Bacillus megaterium
根瘤菌Bacillus subtilis
節(jié)桿菌屬Bacillus subtilis
豬血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒蛋白激AKT1,2,3抗體人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒 胞苷
豬旋毛蟲IgG抗體免疫試劑盒帕金森病相關(guān)蛋白ATP13A2抗體人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒 胞嘧啶
豬胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化蛋白2抗體人紅激因子(ESF)ELISA試劑盒 寶藿苷I
豬心型脂肪結(jié)合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒磷化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體人紅激因子(ESF)ELISA試劑盒 寶藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A
PDGFR抑制劑(AC710)Fmoc-D-天冬酰胺
其他N-芴甲氧羰基-D-天冬酰胺;Fmoc-D-天門冬酰胺;N-(9-芴甲氧羰基)-D-天冬酰胺
英文名稱:Fmoc-D-Asn-OH
其他英文名稱:Fmoc-D-asparagine;N-9-Fluorenylmethoxycarbonyl-D-asparagine
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98%
包裝:1克/5克/25克
CAS號(hào):108321-39-7
C19H18N2O5=354.36
級(jí)別:Purum
含量:≥98.0%
熔點(diǎn):184~185℃
比旋光度:+11~+12°(C=1,DMF)
性狀:結(jié)晶粉末
用途:生化研究。多肽合成
保存:2~8℃