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小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

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參考價(jià)4050
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    經(jīng)銷(xiāo)商
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    上海市

規(guī)格
5×1054050元15 瓶 可售
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) A01X1874 主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
組織來(lái)源 子宮組織 種屬來(lái)源 小鼠
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詳細(xì)介紹

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱(chēng)

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

商品貨號(hào)

A01X1874

組織來(lái)源

子宮組織

種屬來(lái)源

小鼠

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

生長(zhǎng)特性

貼壁

換液頻率

2-3天換液一次

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

 

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

傳代特性:可傳1-2代

消化液:0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介:小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱(chēng)為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱(chēng)子宮黏膜,是指構(gòu)成哺乳類(lèi)子宮內(nèi)壁的一層;②子宮內(nèi)膜對(duì)動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng),因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對(duì)話(huà)"的過(guò)程中,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路:

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機(jī)體中取出,經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞,再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。

6.jpg

實(shí)驗(yàn)步驟:

一、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺(tái)中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜,保留大腦皮質(zhì)。

五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,200-400U DNaseI),混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min,去上清液。

七、沉淀中加入20%BSA重懸浮,充分混勻,1 000×g,20min,4℃離心,去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,100-300U DNaseI )重懸浮,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,700×g室溫離心6min,去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),1000×g,4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,室溫),去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,4ug/ml素 )重懸浮,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基,隨后隔天換液。

2.png
注意事項(xiàng):

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通;由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。
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