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立枯絲核菌染料法熒光定量PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 10:31:21瀏覽次數(shù):253

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013401 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
立枯絲核菌染料法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:IRS-1 (Phospho-Ser636) Antibody
IRS-1 (Phospho-Ser639) Antibody
S6 Ribosomal Protein (Phospho-Ser235) Antibody

詳細介紹

實驗外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

立枯絲核菌染料法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013401

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit 小鼠細胞周期D1Multi-class antibodies: 48T

 Syndecan-1/CD138/FITC 熒光標記多配體聚糖抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey  rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗兔IgG  0.1ml

FT4 游離T4 96T

MAL MAL蛋白抗體 0.1ml

phospho-ATM (Tyr170) 磷化擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 0.1ml

 Syndecan-1/CD138/FITC 熒光標記多配體聚糖抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

VEGF-D(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D) ELISA KIT 人血管內(nèi)皮細胞生長因子DMulti-class antibodies: 48T

 GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗豚鼠IgG  0.1ml

CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit 人銅藍蛋白 96T

RAB35 RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab35抗體 0.2ml

phospho-CDC27 (Ser427) 磷化后期促進復(fù)合蛋白3抗體 0.1ml

 GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

GPR106 G蛋白偶聯(lián)受體106抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Annexin A9 膜粘連蛋白9抗體  0.2ml

 IL-31/FITC 熒光標記白細胞介31抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/FITC FITC標記的兔抗人IgG  0.3ml

 TGF- Beta1/RBITC 紅色熒光羅丹明標記TGF-β1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
立枯絲核菌染料法熒光定量PCR試劑盒脆弱鏈霉菌種屬: Streptomyces│fragilis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain. Produces azaserine培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

棘孢小單孢菌種屬: Micromonospora│echinospora提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Gentamcin B慶大霉B培養(yǎng)基: CM0394生長條件: 35C存儲條件: 真空冷凍干燥

大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 219生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

魯氏接合酵母種屬: Zygosaccharomyces│rouxii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 醬油。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法

血漿激肽釋放(KLKB1)ELISA試劑盒3-甲氧基磺酰 96%偏鋰 ACS, 98.0-102.0%塞克硝唑(標準品)

血漿膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒棕櫚甲酯 分析標準品,≥99.0% (GC)偏鋰 ≥99.9%紅杉,西曲依

血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒6-甲基喹啉 98%二氫鋰 99%醋舍莫瑞林

血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒9-甲基蒽 分析標準品四鋰 99%磺嘧啶銀

血紅氧合1(HO-1)ELISA試劑盒硬脂甲酯 分析標準品,>99.5% (GC)四鋰 99.9%磺嘧啶銀(標準品)

血紅加氧2(HO-2)ELISA試劑盒色標Standard for GC,≥99.5% (GC)四鋰 99.99%辛伐他汀

血紅加氧1(HO-1)ELISA試劑盒蒙脫土K-10 蒙脫土K-10,比表面積 240 m2/g二氫鋰 99.98% metals basis辛伐他汀,辛伐他?。藴势罚?/span>

血紅加氧(HO)ELISA試劑盒聚乙二單甲 平均分子量5000鎳 SP康普瑞汀二鈉鹽

血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒亞麻甲酯 分析標準品鎳粉 99.99% metals basis,200目硫西梭米星/硫西索霉

血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒亞麻甲酯 standard for GC ,≥99.5% (GC)鎳 AR,99.5%硫西梭米星(標準品)

血紅蛋白α亞基(HB-α)ELISA試劑盒亞麻甲酯 99%質(zhì)鎳標樣 濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品 生長抑

血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮  95%納米鎳粉 比表面積10m2/g-60m2/g, 粒度20nm-100nm,99.9%甲磺索拉非尼

血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒油甲酯 分析標準品,>99.0%(GC)電解鎳粉 99.5%,200目甲磺索拉非尼(標準品)

血紅蛋白(Hb)ELISA試劑盒油甲酯 99%還原鎳粉 99.5%,5μm鏈脲佐菌(STZ)

血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒油甲酯 Standard for GC,≥99%(GC)霧化鎳粉 99.8%,200目鏈脲佐菌(標準品)

血管性血友病因子裂解(ADAMTS-13/vWF-cp)ELISA試劑盒甲酯 98%銻鈉 98%硝硫康唑


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