詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒7型探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013525
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
LAIR-2/CD306/FITC 熒光標記白細胞相關(guān)球蛋白樣受體2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SP-A/FITC 熒光標記肺表面活性蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKAP5 A激錨定蛋白5抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/APC APC標記的兔抗馬IgG 0.1ml
GPR30 G蛋白偶聯(lián)受體30抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/FITC FITC標記的兔抗羊IgM 0.3ml
SP-A/FITC 熒光標記肺表面活性蛋白A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人球蛋白j鏈Multi-class antibodies: 48T
RASGRF1 Ras特異性鳥核苷釋放因子1Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HA tag HA tag標簽抗體 0.1ml
HSP-90 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白90 96T
protein C light chain K依賴的蛋白C輕鏈抗體 0.2ml
BTNL9 嗜乳脂蛋白樣9抗體 0.2ml
RASGRF1 Ras特異性鳥核苷釋放因子1Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey human IgG/FITC FITC標記的驢抗人IgG 0.3ml
GCS1 β-葡萄糖苷1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARMCX3 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體 0.2ml
IGC/FITC 熒光標記兔抗非洲爪蟾IGC抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG 0.1ml
PLAUR/uPAR/FITC 熒光標記尿激型纖溶原激活因子受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人皰疹病毒7型探針法熒光定量PCR試劑盒50次霉味假單胞菌種屬: Pseudomonas│mucidolens提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熱脫氮地芽孢桿菌種屬: Geobacillus│thermodenitrificans分離基物: sugar beet juice from extraction installations提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 60℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
粘土壤桿菌種屬: Agrobacterium│viscosum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)L(+)酒石。培養(yǎng)基: CM0384生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
動膠菌樣申氏菌種屬: Shinella│zoogloeoides分離基物: 上流式厭氧污泥層反應堆提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 848生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒4,4'-偶氮(4-基戊) 98%葛根 98%DL-乳(USP)
膽(Cholic acid)ELISA試劑盒 ≥98.0% (HPLC)(劇品)黃藤 分析標準品,≥97%硫氫鈉一(>98%,BC)
膽(CA)ELISA試劑盒 Standard for GC, ≥99.5% (GC)黃藤 97%檸檬三銨
膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)ELISA試劑盒2-乙酰氨基甲 99%(劇品)白藜蘆 分析標準品鉻天青S(Ind Grade)
膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)ELISA試劑盒1,2-并異噻唑啉-3-酮 98%白藜蘆 99%5'-三胞苷二鈉鹽
膽囊收縮(CCK)ELISA試劑盒3,5-二甲 分析標準品白藜蘆 分析標準品,用于食品分析化鋇二
轉(zhuǎn)運體樣蛋白4(SLC44A4)ELISA試劑盒3,5-二甲 98%蘿卜硫 90%纖維(活>45 U/mg)
乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)ELISA試劑盒正己 AR,99.0%雷甲 分析標準品,≥98%化十六基吡啶一(分子生物學級)
乙酰化(CHAc)ELISA試劑盒對羥基聯(lián) 99%對氨基乙酮 AR醋鉛三(>99%,BC)
甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒對羥基聯(lián) 分析標準品,用于環(huán)境分析對氨基乙酮 99%派洛寧Y(Ind Grade)
膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒2-氧基 99%金絲桃 分析標準品,≥96%對羥基甲鈉(>99%,BR)
膽固7α-羥化(CYP7A)ELISA試劑盒芐基基溴化銨 98%金絲桃 96%魚硫鹽來源于鮭魚
膽固(CH)ELISA試劑盒芐基基溴化銨 99%真空手套箱過濾器濾芯5-溴-4--3-吲哚基鹽鈉鹽(分子生物學級)
單絲氨蛋白激1(LIMK1)ELISA試劑盒芐基基化銨 98%上門維修費用乙銅合物(>99%,BR)
單核增多性李斯特菌O((LLO)ELISA試劑盒芐基基氫氧化銨 20%甲溶液真空手套箱用手套 丁基合成橡膠肌鈉鹽四
單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒芐基基氫氧化銨 25%溶液(溴甲基)環(huán) 97%3,3'-二氨基聯(lián)四鹽二(>99%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。