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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鼠PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013552
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
LEF-1/FITC 熒光標記增強因子-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKT3 蛋白激B3 0.1ml
Rabbit horse IgG/Cy5 Cy5標記的兔抗馬IgG 0.1ml
phospho-GAP43 (Ser41) 磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Snake poison Protein/FITC 熒光標記抗蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
HbC(Human Hemoglobin C) ELISA Kit 人血紅蛋白CMulti-class antibodies： 48T
Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷化抑制基因PTEN抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HBeAg(2E6) 人乙型肝炎e抗原單克隆抗體(2) 0.1ml
MBP ELISA Kit 大鼠髓磷脂性蛋白 96T
Prostate and colon associated protein 前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白 0.2ml
phospho-B-Raf (Ser365) 磷化B-Raf抗體 0.1ml
Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷化抑制基因PTEN抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/PE PE標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCNT2 β1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 0.2ml
Iba-1/FITC 熒光標記離子鈣接頭蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/AP 性磷(AP)標記的兔抗猴IgM 0.1ml
PRAS40/AKT1 substrate 1/FITC 熒光標記蛋白激AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鼠PCR試劑盒50次普通變形桿菌種屬: Proteus│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 598生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium palustre提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 地中海粉蛾提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 348生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
乙醇假絲酵母種屬: Candida│ethanolica提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒四 ACS，>99.5% (GC) 甲鈣 96%二十八(>98%,BR)
β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒四乙烯 CP，97%偏釩鈉 AR,99.0% 1-基-5-巰基四氮唑(>98.5%,BR)
β1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移2(B4GALNT2)ELISA試劑盒硫代乙 AR,90.0%五二釩 AR,99.0%（劇品）新戊二(>98%,BR)
α烯化(αENOL)ELISA試劑盒硫代乙 GR,98%4，4'-二（9-咔唑）聯(lián) 98%2,2-二甲基琥珀(>99%,BR)
α烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)ELISA試劑盒硫代乙 CP,85.0%(R)-(+)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 97%2,4,5-氧基甲(>99%,BR)
α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒3,5,5-基己 97%(s)-(-)-N-叔丁氧羰基-3-氨基吡咯 98%三溴酚(>98%,BR)
α酮戊二脫氫(α-KGDHC)ELISA試劑盒叔丁 HPLC，>99.5%(GC)1-Boc-3-(甲氨基) 97%2,4,6-三(二甲氨基)酚(>95%,BC)
α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒叔丁 GR，≥99.5% (GC)2-甲基－8-羥基喹啉對羥基聯(lián)合鋁 95%2,4-二甲基(>98%,BR)
α葡萄糖苷(α-glucosidase)ELISA試劑盒三乙二 99%并噻唑-2-乙 98%2,4-二甲(BR)
α葡萄糖苷(α-Glu)ELISA試劑盒硫二甲酯 AR,98.5%（劇品）鹽西替利 98%2,7-二羥基萘(>98%,BR)
α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒磺胍 98%4,4'-二聯(lián) 98%2, 6-二醌-4-亞(>98%,BR)
α-內(nèi)肽(α-EP)ELISA試劑盒磺嘧啶鈉鹽 98%1-芐基-3-乙氧羰基-4-酮鹽鹽 98%2-金剛(>99%,BR)
α肌動蛋白(α Actin)ELISA試劑盒磺 AR,99.8%(S)-1-Boc-3-羥基吡咯 98%2-金剛酮(>99%,BR)
α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒磺 GCS，>99.8%(HPLC)(R)-3-羥基吡咯鹽鹽 98%2-氨基-3-甲(>98%,BR)
α黑色(α-MSH)ELISA試劑盒磺 分析標準品1,1,7,7-四甲基－8-羥基-9-基-久洛尼定 99%2-溴丁(>98%,BR)
α谷胱甘*S轉(zhuǎn)移(α-GST)ELISA試劑盒鄰二甲二烯酯 CP2,2′-[(4，s)-4-叔丁基-2-噁唑啉] 99%2-溴代萘
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