轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒

轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
服務(wù)流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針（染料法只需設(shè)計(jì)引物）
2、抽提DNA、RNA，并對(duì)RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR
4、提供完整的實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告(檢測(cè)數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴(kuò)增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)定量　Cytohesin 1 　100 ul

細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀　DNAJC2/MPP11 　100 ul

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡　DAPK1 　1 Kit

冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡　CREST 　1 Kit

石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡　DCBLD2 　100 ul

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡　DPPA4 　100 ul

冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡　Claudin 23 　100 ul

石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡　Claudin 7 　20 ul

細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)比色法定量　Cortactin 　100 ul

細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)熒光定量　CKAP4 　100 ul

GSK-3BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析　CKS2 　100 ul

GSK-3BETA蛋白免疫共沉淀分析　Claudin 23 　100 ul

GSK-3BETA蛋白表達(dá)定量　CREB1 　100 ul

細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀　CREB3L2 　100 ul

載玻片細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡　CREST 　100 ul

冰凍切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡　CRMP1 　100 ul
轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒Pseudomonas│aeruginosa分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)脂肪酶培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 26-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│pumilus分離基物: 爛麻絨提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類 研究培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Escherichia│coli提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 保存Human APOBEC3F（126A mutation）基因的基因工程細(xì)菌培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 37C存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)

枯草芽孢桿菌種屬: Bacillus│subtilis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Acidithiobacillus│ferrooxidans分離基物: 礦山酸性中提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 718生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Streptomyces│virginiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rhizopus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Paecilomyce│lilacinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 26℃

Chaetomium│globosum分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。