詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013553
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 人纖維介蛋白Multi-class antibodies: 48T
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Cy3 Cy3標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
AFP-L3(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3) ELISA Kit 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3 96T
NECAB1 神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1抗體 0.2ml
Phospho-Btk (Ser180) 磷化蛋白酪激ATK抗體 0.1ml
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
tox IgM(Human toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體Multi-class antibodies: 48T
PPAR-delta/beta D型-過氧化活化增生受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Heparanase 乙酰肝抗體 0.1ml
EL ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮脂肪 96T
Prostaglandin I2 Receptor 前列環(huán)受體抗體 0.2ml
phospho-Casein kinase I isoforms gamma 1+2+3 ( Tyr263) 磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體 0.1ml
PPAR-delta/beta D型-過氧化活化增生受體抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey rabbit IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的驢抗兔IgG 0.1ml
phospho-GIRK1 (Ser185) 磷化G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ASAH2 ?;拾贝济擋?抗體 0.2ml
IASPP/FITC 熒光標IASPP蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/Bio 生物標記的兔抗猴IgM 0.3ml
phospho-Akt(Thr450) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠磷化蛋白激B抗體(蘇磷化位點:450)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
漢坦病毒通用染料法熒光定量RT-PCR試劑盒50次哈氏弧菌種屬: Vibrioharveyi分離基物: 海安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃
雙歧雙歧桿菌種屬: Bifidobacteriumbifidum(Tissier)Orla-Jensen安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 乳制品發(fā)酵;食品飲料培養(yǎng)基: 62生長條件: 37℃
痤瘡丙桿菌種屬: Propionibacteriumacnes(Gilchrist)DouglasandGunterdepositedasCorynebacteriumacnes安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 多糖劑、厭氧鑒定控制菌株、API質(zhì)量控制菌株培養(yǎng)基: 55生長條件: 37℃
橢圓釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 啤酒酵母培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法
α干擾(IFN-α)ELISA試劑盒D-2-甘氨 99%4-Boc-氨基 98%2-(>99%,BR)
α輔肌動蛋白4(ACTN-4)ELISA試劑盒L?(+)-α-甘氨 98%鉻吡啶 98%5-硝基-2-甲(>98%,BR)
α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒3,5-二甲基-4-吡唑 97%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯 98% 2-乙酰(>98.5%,BR)
α輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒4-羥基-3-甲 98%對四聯(lián) 98%2-(>98%,BR)
α輔肌動蛋白1(ACTN-1)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 96%紅熒烯 99%2-乙基磺鈉(>98%,BR)
α防御4(NP-4)ELISA試劑盒3-硝基鄰二甲 99%(R)-3-氨基-1-BOC- 98%2'-脫氧肌酐-5'-鈉(>98%,BR)
α淀粉(AMY1)ELISA試劑盒吡唑 99%(R)-(-)-3- 氨基吡咯 98%鄰乙氧基甲(>98%,BR)
α淀粉(AMS/AMY)ELISA試劑盒亞硫鈣 90%R-1-芐氧羰基-羥基吡咯 95%鄰乙氧基甲(>98%,BR)
α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒四乙基米氏酮 99%三氧化硫-吡啶復合物 97%2-乙基丁(>99%,BR)
α半乳糖基(α-Gal)ELISA試劑盒米氏酮 98%(S)-1-叔丁氧羰基-3-氨基 98%鄰羥基乙酮(>99%,BR)
α半乳糖苷(αGAL)ELISA試劑盒N-甲基二乙 98%(S)-3-羥基吡咯鹽鹽 97%2-羥基(>98%,BR)
αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA試劑盒N-甲基二乙 99%(S)-3-氨基吡咯 98%2-異基咪唑(>98%,BR)
αL巖藻糖苷(AFU)ELISA試劑盒2-(甲氨基)乙 99%S-1-芐氧羰基-3-羧基吡咯 97%2-萘乙(植物級)
αL艾杜糖苷(IDUA)ELISA試劑盒2,2'-硫代雙乙 99%三(4-) 98%2-萘甲(>98%,BR)
α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒 CP,97.0% (劇品)8-羥基喹啉鋁 98%乙-2-萘酯(>98%,BR)
α2抗纖溶(α2-AP)ELISA試劑盒 AR,99.0%(劇品)2,6-二氟 98%2-基-beta-D-木糖苷(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。