細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP/PI)

細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP/PI)公司*的商品：胎盤生長因子抗體(S)-西酞普蘭N-氧化物 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene
蛋白激酶A抗體(S)-西替利 2,5-Dibromothiazole
蛋白激酶C beta 1/2抗體(S)-酰萘普生-β-D-葡萄糖苷 2,5-Dibromoselenophene
胎盤生長因子抗體(S)-酰

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

其檢測原理為：在正常的活細胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細胞中，PS 從細胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合。可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。

另外，本試劑盒中還提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用來區(qū)分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞。PI是一種核酸染料，它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜，但可以透過凋亡晚期和壞死細胞的細胞膜而使細胞核染紅。因此，將Annexin V與PI聯(lián)合使用時，PI 則被排除在活細胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡細胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被EGFP 和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性（Annexin V+/PI+）。

產(chǎn)品組份：

Annexin V-EGFP———————100 μl

PI Staining Solution————100 μl

1×Binding Buffer——————8 ml

儲存條件：4℃，有效期一年。
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)elisa試劑盒英文名稱：PGLYRP1 ELISA Kit碳酐酶11抗體包裝5g

胎盤鈣黏蛋白(CDHP)elisa試劑盒英文名稱：CDHP ELISA Kitα酪蛋白抗體包裝100g

羧肽酶N1(CPN1)elisa試劑盒英文名稱：CPN1 ELISA Kit周期調(diào)控相關(guān)蛋白1包裝25g

羧肽酶A3(CPA3)elisa試劑盒英文名稱：CPA3 ELISA Kit間粘附分子1抗體包裝5g

羧基賴(CML)elisa試劑盒英文名稱：CML ELISA KitCD105抗體包裝25g

髓樣前體細胞抑制因子2(MPIF2)elisa試劑盒英文名稱：MPIF2 ELISA Kit軸突蛋白5抗體包裝5g

髓細胞觸發(fā)受體2(TREM2)elisa試劑盒英文名稱：TREM2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體包裝1g

髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)elisa試劑盒英文名稱：TREM1 ELISA Kit表皮生長因子樣蛋白1抗體包裝5g

髓分化因子88(MyD88)elisa試劑盒英文名稱：MyD88 ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體包裝1g

性磷酶1(ACP1)elisa試劑盒英文名稱：ACP1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框75抗體包裝5g

性成纖維細胞生長因子(FGF1)elisa試劑盒英文名稱：FGF1 ELISA Kit隱花色素蛋白1抗體包裝1g

速激肽受體2(TACR2)elisa試劑盒英文名稱：TACR2 ELISA Kit隱花色素蛋白2抗體包裝5g

速激肽受體1(TACR1)elisa試劑盒英文名稱：TACR1 ELISA Kit鈣通道L型α2多肽抗體包裝25g

松弛肽(RLN)elisa試劑盒英文名稱：RLN ELISA KitL型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體包裝5g

四旋蛋白30(TSPAN30)elisa試劑盒英文名稱：TSPAN30 ELISA KitL型電壓依賴型鈣通道β4抗體包裝500g

局限青霉Penicillium│restrictum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR總蛋白S試劑盒棕矢車菊素;Jaceosidin

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格：純度> 99%,BR，可用于培養(yǎng)總蛋白C試劑盒紫蘇;Perillyl Alcohol

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2試劑盒竹紅菌乙素;Hypocrellin B
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-EGFP/PI)乙酰膽堿酯酶

英文名稱：ACHE

其他英文名稱：Acetylcholinesterase；Acetylcholine acetylhydrolase；Cholinesterase, Acetyl

產(chǎn)品規(guī)格：BR，200u/g

包裝：250毫克

CAS號：9000-81-1

級別：BR

活力：≥200units/g protein

性狀：類褐色粉末。取自于對農(nóng)藥極為敏感的蒼蠅頭部。在一定條件下有機磷和基甲酯類對膽堿酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥濃度成正比關(guān)系，正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率。通過抑制率可測出產(chǎn)品中是否含有有機磷和基甲酯類農(nóng)藥的存在。

用途：生化研究。用于由酶抑制率法檢測蔬菜、水果中有機磷和基甲酯類農(nóng)藥殘留的各種儀器、分光光度計

保存：2～8℃

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。