化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | A01X1970 | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
| 組織來源 | 眼角膜組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細(xì)介紹
小鼠角膜上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
傳代特性：可傳1-2代左右
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：小鼠角膜上皮細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。其主要功能如下：①角膜是的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細(xì)胞層，外層即是上皮細(xì)胞；②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(zhǎng)因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱 | 小鼠角膜上皮細(xì)胞 | 商品貨號(hào) | A01X1970 |
組織來源 | 眼角膜組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。
實(shí)驗(yàn)步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠嗅鞘細(xì)胞 | CTLA4 IG-24 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
結(jié)蛋白單克隆抗體 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 |
E14 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的白介33抗體 |
Duck embryo 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的磷化細(xì)胞核因子抗體 |
DU145 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的KLHDC8A蛋白抗體 |
DT40 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 |
DRG 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體 |
DLD-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的MED6蛋白抗體 |
DI TNC1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的GTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性腎功能衰竭蛋白） |
DAUDI 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的甘露聚糖結(jié)合凝集絲氨肽1抗體 |
DAMI 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的HORMAD1蛋白抗體 |
CX-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠角膜上皮細(xì)胞堿性磷（AP）標(biāo)記的溶質(zhì)載體家族25成員17抗體 |
CW2 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2B1抗體 |
CTX 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的胃癌相關(guān)蛋白酪氨磷1抗體 |
hccc-9810 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標(biāo)記的載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體 |
注意事項(xiàng)：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)