詳細介紹
商品介紹:
熒光染料PKH26 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標記細胞。對細胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,有著強而穩(wěn)定的紅色熒光。 |
在細胞分裂增殖過程中,PKH26的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減,標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,因此其熒光強度是親代細胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測細胞增殖,細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH26標記細胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中,PKH26標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半,通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同,可檢測出未分裂細胞,分裂一次(1/2的熒光強度),二次(1/4的熒光強度),三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH26可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。經(jīng)PKH26標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。
PKH26標記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久,它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH26 毒性較小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。
PKH26標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。
PKH26標記細胞呈紅色熒光,熒光波長:λex=551 nm,λem=567 nm。
儲存條件:-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500T | 1~3天 |
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
阿扎那韋(標準品)英文名稱: Moxifloxacin Hydrochloride7號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標準品)英文名稱: Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標準品)英文名稱: Salmeterol xinafoate過敏C3受體/補體C3受體抗體包裝5g
愛普列特(標準品)英文名稱: NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標準品)英文名稱: NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標準品)英文名稱: Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
安替比林(標準品)英文名稱: Prednisone煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶(標準品)英文名稱: Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標準品)英文名稱: Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標準品)英文名稱: Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標準品)英文名稱: Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三(標準品)英文名稱: Pamidronate Disodium干擾誘導T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標準品)英文名稱: Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林(標準品)英文名稱: Gentamicin sulfate 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g
基己(標準品)英文名稱: Cefuroxime Sodium 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR血管生長試劑盒α-香附酮;α-Cyperone
: =ATCC15173=CCUG407=CIP7715=DSM30026=ICPB4221=IFO15125=JCM5490=LMG1231=NCTC8582=AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異烏藥內(nèi)酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
PKH26細胞增殖與毒性檢測試劑盒氧化鏑
其他 三氧化二鏑;氧化鏑(Ⅲ)
英文名稱: Dysprosium(III)oxide
其他英文名稱: Dysprosium oxide;Didysprosium trioxide
產(chǎn)品規(guī)格: 3N
包 裝: 5克/25克/100克
CAS號:1308-87-8
Dy2O3=373.00
級別:3N
含量:≥99.9%
性狀:粉末。微有吸濕性,在空氣中能吸收水分和二氧化碳。磁性比氧化高鐵強許多倍。溶于和乙。相對密度(d274)7.81。熔點 2340±10℃。沸點3900℃
用途:生化研究。原子能工業(yè),用作核動力反應(yīng)堆的控制棒。磁性材料。合成用。照明光源。
保存:RT