商品介紹:
熒光染料PKH26 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過(guò)與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對(duì)細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的紅色熒光。 |
在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,PKH26的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH26標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,PKH26標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過(guò)流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH26可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。經(jīng)PKH26標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。
PKH26標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH26 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
PKH26標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。
PKH26標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=551 nm,λem=567 nm。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品屬于:
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Moxifloxacin Hydrochloride7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體包裝1g
阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g
艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Salmeterol xinafoate過(guò)敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g
愛(ài)普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NaproxenCD3抗體包裝1g
安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g
安乃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Prednisone電壓依賴(lài)型N型鈣通道α1B抗體包裝1g
安替比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Prednisone煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g
蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g
砜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g
芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g
芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg
丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pamidronate Disodium干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g
芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g
基比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g
基己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR血管生長(zhǎng)試劑盒α-香附酮;α-Cyperone
: =ATCC15173=CCUG407=CIP7715=DSM30026=ICPB4221=IFO15125=JCM5490=LMG1231=NCTC8582=AS1.1800資源名稱(chēng): 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異烏藥內(nèi)酯;linderalactone
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒氧化鏑
其他 三氧化二鏑;氧化鏑(Ⅲ)
英文名稱(chēng): Dysprosium(III)oxide
其他英文名稱(chēng): Dysprosium oxide;Didysprosium trioxide
產(chǎn)品規(guī)格: 3N
包 裝: 5克/25克/100克
CAS號(hào):1308-87-8
Dy2O3=373.00
級(jí)別:3N
含量:≥99.9%
性狀:粉末。微有吸濕性,在空氣中能吸收水分和二氧化碳。磁性比氧化高鐵強(qiáng)許多倍。溶于和乙。相對(duì)密度(d274)7.81。熔點(diǎn) 2340±10℃。沸點(diǎn)3900℃
用途:生化研究。原子能工業(yè),用作核動(dòng)力反應(yīng)堆的控制棒。磁性材料。合成用。照明光源。
保存:RT