化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
人子宮內(nèi)膜異位癥間質(zhì)細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X1399 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進(jìn)行包被，以增強細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠胚胎干細(xì)胞 | 小鼠角膜上皮細(xì)胞 |
腫瘤壞死因子受體2重組兔單克隆抗體 | AF488標(biāo)記的磷化整合β1/Integrin β1抗體 |
小鼠骺軟骨細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的白介11抗體 |
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的ADP核糖基化因子6抗體 |
小鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白4抗體 |
小鼠滑膜細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的白介1β/IL-1β抗體 |
小鼠肌腱干細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運蛋白家族29成員3抗體 |
小鼠肌源性干細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的Intersectin 2抗體 |
小鼠脊髓成纖維細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的線粒體裂變1蛋白抗體 |
小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的同源蛋白UNCX抗體 |
小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的磷二羥酰基轉(zhuǎn)移抗體 |
小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞 | 人子宮內(nèi)膜異位癥間質(zhì)細(xì)胞AF488標(biāo)記的鳥苷激GMK抗體 |
小鼠角膜成纖維細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的蛋白磷2調(diào)節(jié)亞基5A抗體 |
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的維甲相關(guān)孤兒受體γ抗體 |
小鼠腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | AF488標(biāo)記的FAM193A蛋白抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)