TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)

TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)正在出售的產(chǎn)品：生長(zhǎng)分化因子6抗體林澤蘭內(nèi)酯C（標(biāo)準(zhǔn)品） Dimethyl sulfoxide
鳥嘌呤核苷交換因子GEFT抗體林澤蘭內(nèi)酯D（標(biāo)準(zhǔn)品） Dimethyl sulfoxide
膠漿成熟因子β抗體靈仙新苷 Dimethyl sulfoxide
蛋白偶聯(lián)受體56抗體靈芝（標(biāo)準(zhǔn)品） Dimethyl sulfoxide
腸和大腦特定同源蛋白2抗體

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱：TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)

英文名稱：Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

發(fā)貨周期：1～3天

試劑盒組分：

TdT酶———————————40μl

Biotin-dUTP————————960μl

TdT酶稀釋液(選用)—————500μl

Streptavidin-HRP——————22μl

Streptavidin-HRP稀釋液———1ml

DAB顯色液A————————6ml

DAB顯色液B————————6ml

標(biāo)記反應(yīng)終止液——————6ml

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時(shí)，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標(biāo)記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Streptavidin(Streptavidin-HRP)結(jié)合，最后在HRP的催化下通過(guò)DAB顯色來(lái)顯示凋亡細(xì)胞，從而可以通過(guò)普通光學(xué)顯微鏡檢測(cè)到凋亡的細(xì)胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測(cè)細(xì)胞凋亡的原理。

本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)：

(1)高靈敏度：背景染色極低，陽(yáng)性染色強(qiáng)，可以在單細(xì)胞水平檢測(cè)到細(xì)胞凋亡，同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測(cè)到早期的細(xì)胞凋亡。

(2)特異性好：TUNEL檢測(cè)時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。

(3)快速：僅需約2-3個(gè)小時(shí)即可完成。

(4)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

TUNEL法特異性檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會(huì)檢測(cè)出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。

極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測(cè)。在個(gè)別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測(cè)呈陽(yáng)性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，最好同時(shí)檢測(cè)多個(gè)凋亡指標(biāo)。

儲(chǔ)存條件：-20℃。
注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性，則測(cè)定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè)，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)elisa試劑盒英文名稱：MAP1LC3B ELISA Kit磷酸化β抑制蛋白1抗體包裝1g

微管蛋白β3(TUBB3)elisa試劑盒英文名稱：TUBB3 ELISA Kit磷酸化有絲分裂激酶A抗體包裝25g

網(wǎng)膜素(omentin)elisa試劑盒英文名稱：omentin ELISA Kit磷酸化APS抗體包裝5g

晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒英文名稱：AGEs ELISA Kit有絲分裂激酶A抗體包裝1g

脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)elisa試劑盒英文名稱：DPD ELISA Kit干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體包裝25g

脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒英文名稱：DPD ELISA Kit通道蛋白-2抗體包裝5g

脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)elisa試劑盒英文名稱：DHEA-S ELISA Kit腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體包裝25ml

脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)elisa試劑盒英文名稱：DHEA-S7 ELISA KitADP核糖基化因子樣11抗體包裝5ml

脫氫表雄酮(DHEA)elisa試劑盒英文名稱：DHEA ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體包裝1g

褪黑素(MT)elisa試劑盒英文名稱：MT ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體包裝5g

突觸融合蛋白2(STX2)elisa試劑盒英文名稱：STX2 ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體包裝25g

突觸融合蛋白1A(STX1A)elisa試劑盒英文名稱：STX1A ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白10抗體包裝25g

透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)elisa試劑盒英文名稱：HABP ELISA Kit酰基結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝5g

透明質(zhì)酸(HA)elisa試劑盒英文名稱：HA ELISA Kit氨基?；?抗體包裝25g

銅藍(lán)蛋白(CP/CER)elisa試劑盒英文名稱：CP/CER ELISA Kit脂肪甘油三酯脂酶抗體包裝5g

脂聯(lián)素受體2抗體激肽釋放酶3(KLK3)Torin 2 是一種 mTOR 抑制劑，抑制內(nèi) mTOR 活性，EC50 為 0.25 nM，比作用于 PI3K (EC50: 200 nM) 選擇性高
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(顯色法)中性氧化鋁

其他 層析氧化鋁；α-氧化鋁，三氧化鋁

英文名稱： Alumina

其他英文名稱： Aluminum oxide

產(chǎn)品規(guī)格： FCP，100-200目

包裝：500克

產(chǎn)品規(guī)格： FCP，200-300目

包裝：500克

CAS號(hào)：1344-28-1

Al2O3=101.96

級(jí)別：FCP

目數(shù)：100-200目

pH(100g/L，25℃)：6.5～7.5

活度：合格

水溶解物：≤0.5%

灼燒失量：≤8.0%

干燥失量：≤1.0%

顆粒度：≥75.0%

目數(shù)：200-300目

顆粒度：≥70.0%

性狀：粉末。含有硫酸鈣粘合劑。緩慢地部分溶于堿性水溶液,幾乎不溶于水。

用途：生化研究。薄層色譜吸附劑

保存：RT