中文名稱(chēng):溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒
英文名稱(chēng):Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:>100次
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是一種對(duì)溶酶體中酸性β-半乳糖苷酶進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒,常用作細(xì)胞衰老檢測(cè)時(shí)的對(duì)照。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測(cè)到細(xì)胞或組織中溶酶體酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的檢測(cè),也可以用于組織切片的檢測(cè)。 |
試劑盒組分:
β-半乳糖苷酶染色固定液—————100ml
X-Gal溶液————————————5ml
β-半乳糖苷酶染色液A——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液B——————1ml
β-半乳糖苷酶染色液C——————100ml
絕大多數(shù)正常細(xì)胞都可以檢測(cè)到較高水平的溶酶體β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色時(shí)的參考染色。細(xì)胞衰老特異的β-半乳糖苷酶僅在衰老時(shí)表達(dá),而溶酶體β-半乳糖苷酶幾乎在任何情況下都表達(dá)。
本試劑盒僅染色溶酶體酸性β-半乳糖苷酶,不會(huì)染色衰老特異性的β-半乳糖苷酶,也不會(huì)染色外源轉(zhuǎn)染表達(dá)的用于報(bào)告基因的β-半乳糖苷酶(大腸桿菌的β-半乳糖苷酶)。
如果使用6孔板檢測(cè),足夠測(cè)定100個(gè)樣品;使用24孔板測(cè)定,足夠測(cè)定400個(gè)樣品;使用96孔板測(cè)定,足夠測(cè)定1000個(gè)樣品。對(duì)于組織切片或組織塊,可以檢測(cè)的樣品數(shù)量視樣品的大小而定。對(duì)于普通的切片也至少足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
托吡卡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NateglinideDIP13β抗體包裝1g
托吡酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Nateglinide胎盤(pán)和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體包裝1g
托伐普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): "(-)scopolamine N-butyl bromide "接頭蛋白DOK7抗體包裝10g
托芬那(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Tannic acid特異性DMRT3蛋白抗體包裝50g
托拉塞米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Maraviroc橋粒芯糖蛋白2抗體包裝1g
托萘酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Revalor-H Trenbolone acetate溶體絲蛋白DPP2抗體包裝250mg
托品(鹽托烷司瓊雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SilibininNotch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體包裝1g
托品(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Silibinin動(dòng)力相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
托品N-異基去托品酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ezetimibe形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體包裝1g
托曲珠利;妥曲珠利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ezetimibe磷化DNA基轉(zhuǎn)移1抗體包裝25g
托瑞米芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Mepivacaine HCl磷化DDX58抗體包裝5g
拖拉塞米雜質(zhì)A(4-(3-基)-3-吡啶磺酰...英文名稱(chēng): Amprenavir磷化DDX58抗體包裝100ml
脫羧雷他定/地雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rubitecan磷化結(jié)蛋白抗體包裝1g
妥布霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Polyethylene-polypropylene glycol磷化結(jié)蛋白抗體包裝5g
妥布霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Catharanthine hemitartrate二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體包裝5g
克魯斯假絲酵母Candida│krusei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品維生B3試劑盒商陸皂苷元;Phytolaccageni
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR維生B2試劑盒R-三七皂苷R2 ; R-Notogi
糙皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品維生B12試劑盒三七皂苷Ft1 ;Notoginsen
溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒溴化銫
英文名稱(chēng): Cesium bromide
產(chǎn)品規(guī)格: 2.5N,99.5%
包裝:10克
CAS號(hào):7787-69-1
CsBr=212.81
級(jí)別:2.5N
含量:≥99.5%
Ba:≤0.01%
性狀:結(jié)晶。有吸濕性。易溶于水,溶于乙,幾乎不溶于。相對(duì)密度4.44。熔點(diǎn)636℃。沸點(diǎn)1300℃。半數(shù)致死量(大鼠,腹腔)1400mg/kg。有刺激性。
用途:生化研究。分析試劑。X射線(xiàn)熒光屏。分光計(jì)的棱鏡。吸收杯窗。
保存:RT,避光
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)