詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鴨源性PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-02R6381
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品分類:恒溫?zé)晒夥?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白3Multi-class antibodies: 48T
TRP1/gp75 酪相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GHRF/GHRH 生長釋放抗體 0.1ml
AT ELISA Kit 大鼠抗胰蛋白 96T
Neurokinin A 神經(jīng)激肽A抗體 0.1ml
ART3 二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體 0.2ml
TRP1/gp75 酪相關(guān)蛋白1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝輔因子ⅡMulti-class antibodies: 48T
Phospho-HSP27 (Ser82) 磷化熱休克蛋白27抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARVELD1 候選抑制基因MARVELD1抗體 0.2ml
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3 96T
RNF E3泛蛋白連接A抗體 0.2ml
C17orf87 第十七號染色體開放閱讀框87抗體 0.1ml
Phospho-HSP27 (Ser82) 磷化熱休克蛋白27抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
GFPT1 谷酰胺6-磷果糖轉(zhuǎn)移抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACY1/Aminoacylase 1 氨基?;?抗體 0.2ml
MATH1/FITC 熒光標(biāo)記腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml
Tie2/FITC 熒光標(biāo)記上皮生長因子樣域酪激2IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鴨源性PCR檢測試劑盒組織O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子脫氫表雄酮硫酯elisa檢測試劑盒
血液O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒犬血栓調(diào)節(jié)蛋白elisa檢測試劑盒
體液O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子球蛋白Eelisa檢測試劑盒
細(xì)胞N-鏈接硫酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子前列腺E2elisa檢測試劑盒
組織N-鏈接硫酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子神經(jīng)生長因子elisa檢測試劑盒
血液N-鏈接硫酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3elisa檢測試劑盒
體液N-鏈接硫酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法檢測試劑盒兔子瘦elisa檢測試劑盒
細(xì)胞糖胺多糖(GAG)總含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒雞白血病病抗原elisa檢測試劑盒
組織糖胺多糖(GAG)總含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次雞層連蛋白/板層elisa檢測試劑盒
血液糖胺多糖(GAG)總含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次牛腎上腺elisa檢測試劑盒
體液糖胺多糖(GAG)總含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次植物Celisa檢測試劑盒
細(xì)胞O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次魚類甲狀腺elisa檢測試劑盒
組織O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次牛生長釋放多肽elisa檢測試劑盒
血液O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次魚類超敏C反應(yīng)蛋白elisa檢測試劑盒
體液O鏈接硫酯化糖胺多糖(O-sGAG)含量二甲基亞甲基藍(lán)(DMMB)比色法檢測試劑盒20次雞α干擾elisa檢測試劑盒