中文名稱:細(xì)胞膜紅色熒光探針(DiI)
英文名稱:DiIC18(3)
產(chǎn)品規(guī)格:10mg
發(fā)貨周期:1~3天
本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiI在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長(zhǎng)為549nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為565nm。 |
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
CAS:41085-99-8。
DiI可以溶解于無(wú)水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
DiI被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑。DiI通常不會(huì)影響細(xì)胞的生存力。被DiI標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以存活長(zhǎng)達(dá)4周,在體內(nèi)可以長(zhǎng)達(dá)一年。DiI在經(jīng)過(guò)固定的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day,在活的神經(jīng)元細(xì)胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
DiI除了簡(jiǎn)單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程中細(xì)胞遷移,通過(guò)FRAP檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiI的常用濃度為1-25μM,常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對(duì)于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期一年。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
維A;(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Catharanthine sulfate多巴受體D2抗體包裝5g
維E煙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Catharanthine sulfate多巴受體D1抗體包裝100ml
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Combretastatin A4 多巴受體相互作用蛋白1抗體包裝25ml
維生A醋酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激1抗體包裝5ml
維生B1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激2抗體包裝1g
維生B12(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chrysin多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝500mg
維生B3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chrysin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體包裝100g
維生B6(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Formononetin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝25g
維生C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Formononetin磷化雙皮質(zhì)抗體包裝25g
維生C鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝5g
維生K3,萘醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝1g
萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D(-)-allo-Threonine磷化Disabled 1抗體包裝5g
肟菌酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deoxycorticosterone acetate 雙皮質(zhì)抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Deoxycorticosterone acetate D酪激衰減蛋白2抗體包裝5g
爾雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝25g
: F298資源名稱: 生香毛霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR維生B1試劑盒L-色 ; L-Tryptophan
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品維生A試劑盒石斛堿;Dendrobine
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng) 微管相關(guān)蛋白tau試劑盒麝香草酚; Thymol
細(xì)胞膜紅色熒光探針(DiI)溴化鋰
其他 一水合溴化鋰
英文名稱: Lithium bromide hydrate
產(chǎn)品規(guī)格: CP,95%
包裝:100克
CAS號(hào):23303-71-1
LiBr•H2O=104.86
級(jí)別:CP
含量:≥95.0%
氯化物:≤1.0%
硫鹽:≤0.05%
硝鹽:≤0.005%
堿度(以O(shè)H-計(jì)):≤2.1mmol/100g
水不溶物:≤0.03%
重金屬(以Pb計(jì)):≤0.003%
鐵:≤0.002%
鋇:≤0.03%
澄清度試驗(yàn):≤5號(hào)
度:合格
性狀:結(jié)晶。味微苦。易潮解。44℃失去1分子結(jié)晶水,160℃時(shí)成為無(wú)水物。易溶于水,溶于乙。水溶液對(duì)石蕊呈中性或微堿性。熱的濃溶液能溶解纖維。
用途:生化研究。低溫?zé)峤粨Q介質(zhì)??諝庹{(diào)節(jié)系統(tǒng)
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)