培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
5-溴脫氧尿嘧啶核苷 | 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) | 100mg | 1~3天 |
商品介紹:
目前常用的細(xì)胞增殖標(biāo)記物有4種,DNA聚合酶α(DNA polymerase α),增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA),Ki-67和5-溴脫氧尿嘧啶核苷(Brdu)。其中Brdu為組織細(xì)胞非內(nèi)源性表達(dá)存在,應(yīng)用相對(duì)較廣。Brdu,也稱(chēng)為溴化去氧尿苷,一種合成的胸苷類(lèi)似物,在S期可替代胸腺嘧啶核苷選擇性結(jié)合到細(xì)胞DNA中。從而檢測(cè)細(xì)胞DNA合成和標(biāo)記細(xì)胞分裂,凋亡等行為。在遺傳研究中Brdu可通過(guò)活體注射或細(xì)胞培養(yǎng)加載,然后使用抗Brdu的單克隆抗體進(jìn)行特異性標(biāo)記,ICC或IHC法染色法顯示增殖細(xì)胞。另外,還能同時(shí)結(jié)合其它細(xì)胞標(biāo)記物,雙重染色,來(lái)判斷增殖細(xì)胞的種類(lèi),增殖速度等,對(duì)研究細(xì)胞動(dòng)力學(xué)有著重要意義。 |
CAS:59-14-3
分子式:C9H11BrN2O5
分子量:307.10
外觀:白色或類(lèi)白色粉末
熔點(diǎn):187~189℃
純度(Purity, HPLC):≥99%
溶解性:溶于1M 氫氧化銨(50 mg/ml),水(高達(dá)10 mg/ml);溶于DMF,DMSO,水(加熱)(50-100 mg/ml)
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
毒蕈堿型膽堿受體M3(CHRM3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CHRM3 ELISA Kit毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體包裝100g
毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):CHRM2 ELISA Kit肌鈣集蛋白/收鈣抗體包裝25g
凋亡蛋白激活因子1(APAF1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):APAF1 ELISA Kit鈣結(jié)合蛋白樣39抗體包裝5g
淀粉樣前體蛋白(APP)elisa試劑盒英文名稱(chēng):APP ELISA Kit癌胚抗原相關(guān)粘附分子3抗體包裝1ml
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):APLP1 ELISA Kit20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體包裝1g
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Aβ1-42 ELISA Kit成簇相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)elisa試劑盒英文名稱(chēng):Aβ1-40 ELISA Kit腫瘤/抗原2抗體包裝5g
碘腺原脫碘Ⅲ(DIO3)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DIO3 ELISA Kit腫瘤/抗原1B包裝1g
碘腺原脫碘Ⅱ(DIO2)elisa試劑盒英文名稱(chēng):DIO2 ELISA Kit皮膚T淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原6)包裝5g
抵抗(RETN)elisa試劑盒英文名稱(chēng):RETN ELISA Kit腫瘤/抗原3抗體包裝10mg
低氧誘導(dǎo)因子2α(HIF2α)elisa試劑盒英文名稱(chēng):HIF2α ELISA Kit腦多巴神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體包裝1g
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)elisa試劑盒英文名稱(chēng):HIF1α ELISA Kit鈣依賴(lài)分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體包裝5g
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):LRP1 ELISA Kit膽囊收縮A受體抗體包裝100mg
低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)elisa試劑盒英文名稱(chēng):LDLRAP1 ELISA Kit小腦肽3抗體包裝1g
低密度脂蛋白受體(LDLR)elisa試劑盒英文名稱(chēng):LDLR ELISA Kit周期依賴(lài)性激樣5抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,醋鹽形式遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1試劑盒鹽伊立替康;Irinotecan hy
: ivcas7.00510資源名稱(chēng): 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>920U/MG,USP原纖維蛋白-1試劑盒氧化前胡;Oxypeucedanin
: =DSMZ20259資源名稱(chēng): 嗜熱鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%原鈣黏1試劑盒羊藿次苷I;Icarisid I
5-溴脫氧尿嘧啶核苷乙二胺四乙二鈉銅鹽
其他 乙二胺四乙銅二鈉;EDTA二鈉銅;乙二胺基四乙銅二鈉鹽
英文名稱(chēng): Ethylenediaminetetraacetic acid copper(II) disodium salt
其他英文名稱(chēng): Edathamil;EDTA copper(II) disodium salt
產(chǎn)品規(guī)格: 超純,98%
包裝:250克
CAS號(hào):39208-15-6
Cu(OOCCH2)2NCH2CH2N(CH2COONa)2=397.74
級(jí)別:Ultra pure grade
含量:≥98.0%
水分:≤12%
性狀:粉末
用途:生化研究。絡(luò)合劑。食品、油脂、飲料的色澤穩(wěn)定劑。調(diào)味劑
保存:RT