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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Caspase-8 Colorimetric Assay Kit | 20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用。在CD95 凋亡途徑中， Caspase-8 作為最上游的級聯(lián)酶，可被TNF 激活。受細(xì)胞表面受體（如Fas）的激活，Caspase-8 能引起下游級聯(lián)酶的活性，如Caspase-3。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中，沒有活性；但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段，它可被激活。Caspase-8 分光光度法檢測試劑盒就是將caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)，當(dāng)該底物被caspase-8 剪切后，發(fā)色基團(tuán)即游離出來，可通過酶標(biāo)儀或分光光度計（λ=405nm 或400nm）測定其吸光值，可考察caspase-8 的活化程度。 |
注意事項
1. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機(jī)制，這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變，需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號通路。
2. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個或新鮮組織100mg，以便能達(dá)到測定需要的100~200μg 蛋白的要求，因為Caspase-8 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān)，如測定的OD 值偏低，可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
促狀腺激素(TSH)elisa試劑盒英文名稱：TSH ELISA Kit腺苷環(huán)化酶10抗體包裝5g
促黃體激素(LH)elisa試劑盒英文名稱：LH ELISA Kit腺苷環(huán)化酶5抗體包裝25g
促紅細(xì)胞生成素(EPO)elisa試劑盒英文名稱：EPO ELISA Kit腺苷環(huán)化酶6抗體包裝5g
雌三(E3)elisa試劑盒英文名稱：E3 ELISA Kit腺苷環(huán)化酶9抗體包裝5g
雌激素硫轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)elisa試劑盒英文名稱：SULT1E1 ELISA Kit肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2（2號染色體）抗體包裝1g
雌激素(E)elisa試劑盒英文名稱：E ELISA Kit三磷腺檸檬裂解酶抗體包裝5g
雌二受體(ER)elisa試劑盒英文名稱：ER ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體包裝25g
雌二(E2)elisa試劑盒英文名稱：E2 ELISA Kit內(nèi)收蛋白a1抗體包裝5g
垂體腺苷環(huán)化酶激活肽(PACAP)elisa試劑盒英文名稱：PACAP ELISA Kitα2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體包裝100ml
垂草扁桃(VMA)elisa試劑盒英文名稱：VMA ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝25ml
穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa試劑盒英文名稱：PF/PFP ELISA Kit早老素γ分泌酶抗體包裝5ml
程序性死亡1(PD-1)elisa試劑盒英文名稱：PD-1 ELISA Kit鈉ATP酶蛋白a1抗體包裝100ml
成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)elisa試劑盒英文名稱：FGF9 ELISA KitRho鳥苷交換因子2抗體包裝25ml
成纖維細(xì)胞生長因子8(FGF8)elisa試劑盒英文名稱：FGF8 ELISA Kit磷化Rho鳥苷交換因子2抗體包裝1g
成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)elisa試劑盒英文名稱：FGF6 ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶9抗體包裝25g
載脂蛋白E抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Clemizole is a H1 histamine receptor antagonist.Recently, researchers have ident
Caspase 8分光光度法檢測試劑盒原三乙酯
其他 1，1，1-三乙氧基烷；原乙酯；三乙氧基烷；鄰酯；三乙基
英文名稱： Triethyl orthopropionate
其他英文名稱： Orthopropionic acid triethyl ester；1,1,1-Triethoxypropane
產(chǎn)品規(guī)格： AR，97%
包 裝： 25毫升/100毫升/500毫升
CAS號：115-80-0
C9H20O3=176.25
級別：AR
含量：≥97.0%(GC)
折光率：1.4010～1.4040
比重：0.8850～0.8910
性狀：無色透明液體。水中分解。沸點：158℃，閃點：60℃
用途：生化研究。用于有機(jī)合成、染料工業(yè)、制藥工業(yè)和膠片增感劑。
保存：RT
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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