詳細介紹
英文名稱:SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是一種常用的比色法檢測細胞增殖和毒性的試劑盒,其檢測原理:磺酰羅丹明(Sulforhodamine B,SRB)是一種水溶性蛋白染料,能與細胞內(nèi)蛋白堿性氨基酸結(jié)合形成復(fù)合物,其結(jié)合于細胞中總蛋白量的多少可以反映細胞數(shù)的多少。在515nm波長處測得的吸光值與細胞數(shù)呈良好的線性關(guān)系。 本試劑盒檢測速度快、線性好、操作簡單方便,以96孔板為例,可檢測500次。 |
使用方法(以96孔板為例)
1)取出細胞,棄去培養(yǎng)液;
2)小心加入固定液,每孔100μl,4℃孵育1h,棄去固定液;
3)加入清洗液1,每孔100μl,室溫下靜置30s,棄去清洗液1,重復(fù)該步驟;
4)加入染色液,每孔50μl,室溫下避光孵育15min,棄去染色液;
5)加入清洗液2,每孔100μl,棄去清洗液2(該步驟需快速完成,以免染色漏出胞外),重復(fù)該步驟5-10次,直至把多染料洗盡為止;
6)加入溶解液,每孔100μl,室溫下避光孵育5min;
7)于515nm波長檢測其吸光值。
儲存條件:4℃,有效期1年
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
蛋白激活受體3(PAR3)elisa試劑盒英文名稱:PAR3 ELISA Kitα1-chimaerin蛋白抗體包裝25g
蛋白激活受體2(PAR2)elisa試劑盒英文名稱:PAR2 ELISA Kit信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體包裝5g
蛋白3(PR3)elisa試劑盒英文名稱:PR3 ELISA Kit鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白1抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1)包裝1g
蛋白磷3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1)elisa試劑盒英文名稱:PPP3R1 ELISA Kit鈣調(diào)神經(jīng)磷調(diào)節(jié)蛋白3抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白3)包裝5g
蛋白酪磷受體O(PTPRO)elisa試劑盒英文名稱:PTPRO ELISA KitCentaurin α1抗體包裝1g
蛋白酪磷受體H(PTPRH)elisa試劑盒英文名稱:PTPRH ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11/鋅指蛋白856抗體包裝5g
蛋白激抑制因子γ(PKIγ)elisa試劑盒英文名稱:PKIγ ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11B抗體包裝25g
蛋白激抑制因子β(PKIβ)elisa試劑盒英文名稱:PKIβ ELISA Kit鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g
蛋白激N2(PKN2)elisa試劑盒英文名稱:PKN2 ELISA Kit阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體包裝100mg
蛋白激D1(PRKD1)elisa試劑盒英文名稱:PRKD1 ELISA Kit老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體包裝1g
蛋白激Cη(PKCη)elisa試劑盒英文名稱:PKCη ELISA Kit凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體包裝25g
蛋白激Cζ(PKCζ)elisa試劑盒英文名稱:PKCζ ELISA Kit豬圓環(huán)?、蛐鸵職さ鞍卓贵w包裝5g
蛋白激Cε(PKCε)elisa試劑盒英文名稱:PKCε ELISA Kit血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體包裝25g
蛋白激Cδ(PKCδ)elisa試劑盒英文名稱:PKCδ ELISA Kit干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝5g
蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)elisa試劑盒英文名稱:PICK1 ELISA Kit離子通道蛋白6抗體包裝1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:purity>99.0%,BR魚精蛋白1試劑盒葉黃;Xanthophyll
粗壯假絲酵母Candida│valida 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品誘導(dǎo)型一氧化氮合成試劑盒愈創(chuàng)木酚;Guaiacol
: Charwoman資源名稱: 鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%有絲分裂原活化蛋白激14試劑盒異丁香酚;Isoeugenol
磺酰羅丹明B(SRB)細胞增殖和毒性檢測試劑盒乙二胺四乙二鈉錳鹽
其他 乙二胺四乙錳二鈉;EDTA二鈉錳;EDTA錳二鈉;EDTA錳鈉鹽
英文名稱: Manganese disodium EDTA trihydrate
其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate;EDTA manganese(II) disodium salt trihydrate
產(chǎn)品規(guī)格: AR,97%
包裝:100克
CAS號:15375-84-5
C10H12N2O8MnNa2•xH2O=389.13(anhydrous basis)
級別:AR
含量:≥97.0%
水分:≤10.0%
性狀:粉末
用途:生化研究。絡(luò)合劑。食品、油脂、飲料的色澤穩(wěn)定劑。調(diào)味劑
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)