詳細介紹
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
英文名稱:Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細胞及新鮮組織Caspase-8 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中Caspase-8 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-8 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-8 由兩個大亞基和兩個小亞基組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細胞凋亡。Caspase-8 熒光檢測試劑盒就是將Caspase-8 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團。當?shù)孜锉籆aspase-8 剪切后,發(fā)色基團即游離出來,可通過熒光酶標儀測定其熒光強度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。 |
注意事項
1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 對某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-8 活化的機制,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-8 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。
3. 細胞數(shù)量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg,以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因為Caspase-8 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測定的RFU 值偏低,可以通過適當延長反應(yīng)的時間,如果值還是不高,可通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
成纖維細胞生長因子4(FGF4)elisa試劑盒英文名稱:FGF4 ELISA Kit艾滋病病制約錨定蛋白抗體包裝5g
成纖維細胞生長因子13(FGF-13)elisa試劑盒英文名稱:FGF-13 ELISA Kit腺苷環(huán)化酶1抗體包裝1g
成纖維細胞生長因子10(FGF10)elisa試劑盒英文名稱:FGF10 ELISA Kit核糖核酶L抑制蛋白抗體包裝5g
超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒英文名稱:SOD ELISA KitRho GTP酶激活蛋白24抗體包裝25g
超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa試劑盒英文名稱:hs-CRP ELISA KitGTP酶激活蛋白ASAP3抗體包裝5g
腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒英文名稱:iFABP ELISA Kit激活素受體1C抗體包裝25g
叉頭框蛋白03(FoxP3)elisa試劑盒英文名稱:FoxP3 ELISA Kit整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶13型抗體包裝1g
層連蛋白/板層素(LN)elisa試劑盒英文名稱:LN ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶11抗體包裝25g
草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)elisa試劑盒英文名稱:PAT ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶12抗體包裝5g
不對稱二基精(ADMA)elisa試劑盒英文名稱:ADMA ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶15抗體包裝1g
補體因子H(CFH)elisa試劑盒英文名稱:CFH ELISA Kit去整合素樣金屬蛋白酶2抗體包裝25g
補體片斷5a(C5a)elisa試劑盒英文名稱:C5a ELISA Kit載脂蛋白E2受體抗體包裝5g
補體片斷3a(C3a)elisa試劑盒英文名稱:C3a ELISA Kit腺苷A1受體抗體包裝100g
補體蛋白5(C5)elisa試劑盒英文名稱:C5 ELISA Kit通道蛋白0抗體包裝1g
補體蛋白4(C4)elisa試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體包裝25g
淀粉樣肽前體蛋白抗體結(jié)締組織生長因子(CTGF)Isoindigotin is used in the therapy of Y.
Caspase 8熒光法檢測試劑盒(AFC)玉米烯酮
其他玉米赤霉烯酮;赤霉烯酮
英文名稱:Zearalenone
其他英文名稱:[S-(E)]-3,4,5,6,9,10-Hexahydro-14,16-dihydroxy-3-methyl-1H-2-benzoxacyclotetradecin-1,7(8H)-dione
產(chǎn)品規(guī)格:BR,98%
包 裝: 10毫克/25毫克
CAS號:17924-92-4
C18H22O5=318.36
級別:BR
含量:≥98%
干燥失重:5~8.5%
重金屬:≤20ppm
性狀:淺黃色粉末,well soluble in dilute solutions of alkali hydroxides or carbonates用途:生化研究。