臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒

臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒公司*的商品：突觸生長相關(guān)蛋白抗體一枝黃花（標(biāo)準(zhǔn)品） Chlorhexidine Acatate
NDUFA9蛋白抗體伊貝母(新疆貝母)（標(biāo)準(zhǔn)品） Cyclopenthiazide
間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰丁香酚 L-Methyldopa
磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰杠柳寡糖C L-Methyldopa
核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體

產(chǎn)品屬于：

商品介紹：

使用方法

1）對于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，對其充分清洗后，加入適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液；對于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。

2）取0.1ml單細(xì)胞懸液，按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色3~10min。

【注】：因臺盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性，染色時(shí)間過久會導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色，干擾計(jì)數(shù)。通常染色3min即可。

3）取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)，于顯微鏡低倍鏡下計(jì)數(shù)，分別計(jì)算著色細(xì)胞（即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和總細(xì)胞。

【注1】：用移液槍加染色細(xì)胞時(shí)，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個(gè)小室。不可過量加液或者不足量。

【注2】：1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通?？刂圃?0-50 cells，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過200個(gè)，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。

4）按照以下公式來計(jì)算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，

a，計(jì)算每ml細(xì)胞數(shù)目：Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；【注】：此時(shí)的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)

b，總細(xì)胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細(xì)胞懸液的總體積

c，細(xì)胞活力值：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)×100

【注】：通常情況，健康的對數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到95%。

儲存條件：室溫，有效期2年
培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)elisa試劑盒英文名稱：MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體包裝25g

單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)elisa試劑盒英文名稱：MCP1 ELISA Kit周期B3抗體包裝1g

單氧化A(MAOA)elisa試劑盒英文名稱：MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗體包裝25g

存活(Surv)elisa試劑盒英文名稱：Surv ELISA Kit上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7包裝5g

簇集蛋白(CLU)elisa試劑盒英文名稱：CLU ELISA Kit周期D結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

促胰液(SCT)elisa試劑盒英文名稱：SCT ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體包裝5g

促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa試劑盒英文名稱：TPPP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體包裝1g

促泌(SCGN)elisa試劑盒英文名稱：SCGN ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體包裝25g

刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)elisa試劑盒英文名稱：HHIP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體包裝5g

次磷核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)elisa試劑盒英文名稱：HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝5mg

雌激受體β(ERβ)elisa試劑盒英文名稱：ERβ ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體包裝100g

雌激受體α(ERα)elisa試劑盒英文名稱：ERα ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體包裝25g

垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)elisa試劑盒英文名稱：ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體包裝25g

穿孔1(PRF1)elisa試劑盒英文名稱：PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體包裝5g

成纖維細(xì)胞生長因子受體3(FGFR3)elisa試劑盒英文名稱：FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體包裝25g

光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers. 質(zhì)量規(guī)格：含量>98.5%，類白色粉末游離三狀腺原試劑盒鹽白屈菜紅堿;Chelerythrin

嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP31游離肉堿elisa試劑盒銀杏酚;Ginkgolic acids

豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離前列腺特異性抗原試劑盒野菊花內(nèi)酯;Yejunualactone
臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒乙二胺四乙二鈉鎂鹽

其他 EDTA二鈉鎂；乙二胺四乙鎂二鈉鹽； (OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)甘合]](4-)-N,N’,O,O’,O,N,O,N’-鎂(2-)二鈉鹽；EDTA鎂鈉鹽

英文名稱： EDTA-MgNa2

其他英文名稱： Ethylenediaminetetraacetic acid disodium magnesium salt；EDTA magnesium disodium；Magnesium sodium ethylenediaminetetraacetate

產(chǎn)品規(guī)格： CP，98.5%

包裝：100克

CAS號：14402-88-1

C10H12N2Na2MgO8=358.50

級別：CP

含量：98.5～101.0%

澄清度試驗(yàn)：合格

鐵：≤0.002%

重金屬：≤0.001%

性狀：結(jié)晶性粉末。易潮解。溶于水和

用途：生化研究。絡(luò)合劑，測定鋼鐵中鎳、絡(luò)、錳離子(用于取代滴定)。

保存：RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。