中文名稱:CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:500T
發(fā)貨周期:1~3天
熒光染料CFSE(CFDA-SE),是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFSE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料,可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFSE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM 體,所以自身不發(fā)熒光,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,在活細(xì)胞內(nèi)與胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFSE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解發(fā)出綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合,固定在細(xì)胞內(nèi),不會(huì)漏出細(xì)胞外。CFSE 進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,在細(xì)胞核的熒光強(qiáng)。 |
在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,CFSE的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。CFSE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過(guò)流式細(xì)胞儀(FL1 通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFSE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。
CFSE標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。CFSE 毒性小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè),也可以用于成纖維細(xì)胞、NK 細(xì)胞等其它細(xì)胞的增殖檢測(cè)。
CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測(cè)時(shí)的激發(fā)波長(zhǎng)可以選擇488nm,此時(shí)的發(fā)射波長(zhǎng)為516nm,使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)可以采用FL1 detection channel。CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
儲(chǔ)存條件:CFSE須-20℃避光保存,注意防潮。
有效期:六個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
磺地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Enrofloxacin CHIC2蛋白抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體包裝5g
,安息香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Enrofloxacin HCL磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝100ml
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zolmitriptan磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝25ml
硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thymosin alpha 1 Acetate磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝50MG
硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tegafur磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝25g
利扎曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tegafur遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體包裝5g
鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acipimox遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白樣抗體包裝50MG
乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acipimox腺癌標(biāo)志物CHMP2A抗體包裝1g
噻啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adapalene染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體包裝5g
妥英(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adapalene染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5抗體包裝100g
妥英鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adefovir間隙連接蛋白31.1抗體包裝25g
溴馬?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Adefovir緊密連接蛋白10抗體包裝100g
扎貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: alfacalcidol緊密連接蛋白23抗體包裝1g
扎銨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PS 48緊密連接蛋白22抗體包裝25g
: GIMSCAU1.048資源名稱: 肺炎克雷伯氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管緊張Ⅱ受體2抗體試劑盒柚皮甙二氫查爾酮;Naringin di
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%血管緊張Ⅱ受體2試劑盒血根堿;Sanguinarine
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管緊張Ⅱ受體1抗體試劑盒香葉木;Diosmetin
CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒羊毛脂
其他 無(wú)水羊毛脂
英文名稱: Lanolin
其他英文名稱: Lanolin anhydrous;Wool fat
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包 裝: 500克
CAS號(hào):8006-54-0
級(jí)別:CP
熔點(diǎn):≥39℃
水分:≤0.3%
皂化值:92~106mgKOH/g
灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%
性狀:黃色黏性半固體油脂。微有氣味或幾乎無(wú)氣味。幾乎不溶于水,但能與約2倍重量的水混合而不分開(kāi),易溶于、二硫化碳、,微溶于冷乙,但更多溶于熱。相對(duì)密度0.9242。熔點(diǎn)38~42℃。碘值18~36。閃點(diǎn)>110℃。
用途:生化研究。乳化劑。抗泡劑。防銹劑。緩蝕劑。制藥助劑?;瘖y品制備。氣相色譜固定液(高使用溫度200℃,溶劑為),分離分析非極性化合物、乙、芳香族及雜環(huán)族化合物和揮發(fā)油
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)