人單核細胞

人單核細胞公司正在出售的產品：大鼠小梁網(wǎng)細胞大鼠小腦顆粒細胞大鼠心肌成纖維細胞大鼠心肌細胞大鼠心臟干細胞大鼠心臟微血管內皮細胞大鼠心臟纖維原細胞Gelsolin 人凝溶膠蛋白ELISA檢測試劑盒Cyclin-D1 人細胞周期D1ELISA檢測試劑盒Cyclin-D2 人細胞周期D2ELISA檢測試劑盒Cyclin-D3 人細胞周期D3ELISA檢測試劑盒HSP-20 人熱休克蛋白20ELISA檢測

一、細胞基本屬性

 

組織來源：外周血

種屬來源：人

細胞簡介：單核細胞是血液中最大的血細胞，是機體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。與其他 血細胞比較，單核細胞內含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。 它通過吞噬和產生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。D單核細胞能吞噬 異物產生抗體，  在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要 的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數(shù)百分比發(fā)生變化，  因此 檢查單核細胞計數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。在機體的防護、免疫和創(chuàng)傷愈 治過程中起協(xié)同作用。盡管它們是血液中的一類細胞成分，但它們功能的發(fā)揮， 更多地體現(xiàn)在循環(huán)管道外的器官組織中。在功能方面它們與這些器官組織中的許 多細胞成分如巨噬細胞、肥大細胞、成纖維細胞等密切相關。

培養(yǎng)基：原代巨噬細胞培養(yǎng)體系

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：半懸浮培養(yǎng)

細胞形態(tài)：單核細胞

傳代特性：細胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣，95%；CO2 ，5%

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法

人單核細胞是一種半懸浮培養(yǎng)細胞，細胞形態(tài)呈單核細胞，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。

3. 細胞收貨脫落

1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內；

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。

5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

四、注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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