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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T | FS-02R6482 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照）， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
TAP ELISA Kit 大鼠胰蛋白原激活肽Multi-class antibodies： 48T
TREM1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 0.2ml
ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合樣金屬蛋白8 96T
NPDC1 神經(jīng)細(xì)胞增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體 0.2ml
beta Amyloid 1-28 β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體 0.1ml
TREM1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人膽囊收縮/縮膽囊八肽Multi-class antibodies： 96T
COX10 氧化10抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAPKAPK5/PRAK p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體 0.2ml
Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱肽4 96T
RMND5B RMND5B蛋白抗體 0.2ml
Calpain 14 鈣激活蛋白14抗體 0.2ml
COX10 氧化10抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
Galectin 1 半乳糖凝集1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS9 整合樣金屬蛋白與9型抗體 0.1ml
MAdCAM-1/Biotin 生物標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml
Telomerase Binding Protein，P23/FITC 熒光標(biāo)記端粒結(jié)合蛋白P23抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
嗜水氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒通用型豬細(xì)小病毒（PPV）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠白介12elisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬沙門(mén)氏菌（Swine Salmonella）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠L選擇elisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬傳染性胃腸炎/豬呼吸（TGEV/PRCV）20次小鼠肝生長(zhǎng)因子elisa檢測(cè)試劑盒
基因檢測(cè)試劑盒小鼠單核趨化蛋白2elisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬圓環(huán)病毒（CIRCOVIRUS）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠球蛋白Gelisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬輪狀病毒（Porcine rotavirus）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠鐵蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬胸膜肺炎（APP）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠補(bǔ)體片斷5aelisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬副豬嗜血桿菌（HPS）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠疊氮胸苷elisa檢測(cè)試劑盒
通用型豬布病基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠兒茶酚elisa檢測(cè)試劑盒
通用型牛Q熱?。≦ Fever）基因檢測(cè)試劑盒20次大鼠P物質(zhì)受體elisa檢測(cè)試劑盒
通用型牛腹瀉病毒/臨界病毒（Border Disease；BDV）20次大鼠周期D2elisa檢測(cè)試劑盒
基因檢測(cè)試劑盒大鼠肌鈣蛋白Ⅰelisa檢測(cè)試劑盒
通用型牛新孢子蟲(chóng)?。?/span>Neospora caninum）基因檢測(cè)試劑盒20次小鼠乙型肝炎核心抗體elisa檢測(cè)試劑盒
通用型牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）20次小鼠血管生成2elisa檢測(cè)試劑盒
pcr試劑盒小鼠間粘附分子3elisa檢測(cè)試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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