詳細介紹
英文名稱:Caspase-3 Fluorescence Metric Assay
產品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細胞及新鮮組織caspase-3 檢測。Caspase 家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3 為關鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質凝聚和凋亡小體形成有關。Caspase-3 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-3 由兩個大亞基和兩個小亞基組成,裂解相應的胞漿胞核底物,最終導致細胞凋亡。Caspase-3 熒光檢測試劑盒就是將caspase-3 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團。當?shù)孜锉籆aspase-3 剪切后,發(fā)色基團即游離出來,可通過熒光酶標儀測定其熒光強度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。 |
注意事項
1. Caspase-3 Substrate 避光保存及使用。
2. 對某些凋亡誘導劑引起的細胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-3 活化的機制,這種情況時利用本試劑盒檢測Caspase-3 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機制中的其他信號通路。
3. 細胞數(shù)量需達到3~5×106 個或新鮮組織50~100mg,以便能達到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因為Caspase-3 的活性與細胞裂解液的蛋白含量有關,如測定的RFU 值偏低,可以通過適當延長反應的時間,如果值還是不高,可通過增加細胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
多巴胺(DA)elisa試劑盒英文名稱:DA ELISA Kit自噬相關蛋白16A抗體包裝10mg
對氨基苯酸(PABA)elisa試劑盒英文名稱:PABA ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4D抗體包裝10MG
端粒酶(TE)elisa試劑盒英文名稱:TE ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4C抗體包裝1g
毒蕈鹼乙酰膽堿受體M2(CHRM2)elisa試劑盒英文名稱:CHRM2 ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白7抗體包裝250mg
毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)elisa試劑盒英文名稱:TSST-1 ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白16A抗體包裝5g
疊氮胸苷(AZT)elisa試劑盒英文名稱:AZT ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白9A抗體包裝10MG
凋亡誘導因子(AIF)elisa試劑盒英文名稱:AIF ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關因子配體(FASL)elisa試劑盒英文名稱:FASL ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關因子(FAS/CD95)elisa試劑盒英文名稱:FAS/CD95 ELISA Kit磷酸化腫瘤血管內皮標志物8抗體包裝5g
第八因子相關抗原(FⅧAg)elisa試劑盒英文名稱:FⅧAg ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4A抗體包裝1g
抵抗素(Resistin)elisa試劑盒英文名稱:Resistin ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白4C抗體包裝5g
低氧誘導因子1α(HIF-1α)elisa試劑盒英文名稱:HIF-1α ELISA Kit磷酸化自噬相關蛋白16A抗體包裝100g
低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)elisa試劑盒英文名稱:LDL-IC ELISA Kit磷酸化蛋白激酶AKT3抗體包裝25g
低密度脂蛋白(LDL)elisa試劑盒英文名稱:LDL ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2抗體包裝500g
蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒英文名稱:PP ELISA Kit磷酸化通道蛋白2抗體包裝1g
凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)結締組織生長因子(CTGF)Ampalex (Ampakine CX516; CX516; BDP 12) is an ampakine and nootropic that acts a
Caspase 3熒光法檢測試劑盒(AFC)原色硅膠
英文名稱:Silicagel,original color
產品規(guī)格:AR
包裝:500克
CAS號:63231-67-4
分子式:mSiO2•nH2O
級別:AR
干燥失重:≤5.0%
水吸附量:≥32.0%
性狀:玻璃狀微帶棕色無定形多孔性顆?;蛐≈闋?。為部分水合的二氧化硅。有吸濕性。耐熱、耐鹽酸、硫酸、硝酸等的浸漬。具高活性,可再生。溶于氫氟酸和強堿溶液,不溶于水
用途:生化研究。吸附劑。脫水劑。有機液體中除去水分。氣體干燥劑。殺蟲劑
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