中文名稱:Caspase 3熒光法檢測試劑盒(AFC)
英文名稱:Caspase-3 Fluorescence Metric Assay
產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒適用于培養(yǎng)細(xì)胞及新鮮組織caspase-3 檢測。Caspase 家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著非常重要的作用,其中caspase-3 為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,與DNA 斷裂、染色質(zhì)凝聚和凋亡小體形成有關(guān)。Caspase-3 在正常狀態(tài)下以酶原的形式存在于胞漿中,沒有活性;但在細(xì)胞發(fā)生凋亡階段,它被激活,活化的Caspase-3 由兩個(gè)大亞基和兩個(gè)小亞基組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-3 熒光檢測試劑盒就是將caspase-3 序列特異性的多肽偶聯(lián)至發(fā)色基團(tuán)。當(dāng)?shù)孜锉籆aspase-3 剪切后,發(fā)色基團(tuán)即游離出來,可通過熒光酶標(biāo)儀測定其熒光強(qiáng)度(激發(fā)波長=485nm,發(fā)射波長=535nm)。 |
注意事項(xiàng)
1. Caspase-3 Substrate 避光保存及使用。
2. 對(duì)某些凋亡誘導(dǎo)劑引起的細(xì)胞凋亡可能存在非依賴于Caspase-3 活化的機(jī)制,這種情況時(shí)利用本試劑盒檢測Caspase-3 活性無明顯改變,需要考慮凋亡機(jī)制中的其他信號(hào)通路。
3. 細(xì)胞數(shù)量需達(dá)到3~5×106 個(gè)或新鮮組織50~100mg,以便能達(dá)到測定需要的100~200μg 蛋白的要求,因?yàn)镃aspase-3 的活性與細(xì)胞裂解液的蛋白含量有關(guān),如測定的RFU 值偏低,可以通過適當(dāng)延長反應(yīng)的時(shí)間,如果值還是不高,可通過增加細(xì)胞數(shù)量或組織量的方法來提高蛋白量。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
多巴胺(DA)elisa試劑盒英文名稱:DA ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝10mg
對(duì)氨基苯酸(PABA)elisa試劑盒英文名稱:PABA ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝10MG
端粒酶(TE)elisa試劑盒英文名稱:TE ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝1g
毒蕈鹼乙酰膽堿受體M2(CHRM2)elisa試劑盒英文名稱:CHRM2 ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白7抗體包裝250mg
毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)elisa試劑盒英文名稱:TSST-1 ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝5g
疊氮胸苷(AZT)elisa試劑盒英文名稱:AZT ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝10MG
凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa試劑盒英文名稱:AIF ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關(guān)因子配體(FASL)elisa試劑盒英文名稱:FASL ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝1g
凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)elisa試劑盒英文名稱:FAS/CD95 ELISA Kit磷酸化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體包裝5g
第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒英文名稱:FⅧAg ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體包裝1g
抵抗素(Resistin)elisa試劑盒英文名稱:Resistin ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝5g
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)elisa試劑盒英文名稱:HIF-1α ELISA Kit磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體包裝100g
低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)elisa試劑盒英文名稱:LDL-IC ELISA Kit磷酸化蛋白激酶AKT3抗體包裝25g
低密度脂蛋白(LDL)elisa試劑盒英文名稱:LDL ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2抗體包裝500g
蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒英文名稱:PP ELISA Kit磷酸化通道蛋白2抗體包裝1g
凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)結(jié)締組織生長因子(CTGF)Ampalex (Ampakine CX516; CX516; BDP 12) is an ampakine and nootropic that acts a
Caspase 3熒光法檢測試劑盒(AFC)原色硅膠
英文名稱:Silicagel,original color
產(chǎn)品規(guī)格:AR
包裝:500克
CAS號(hào):63231-67-4
分子式:mSiO2•nH2O
級(jí)別:AR
干燥失重:≤5.0%
水吸附量:≥32.0%
性狀:玻璃狀微帶棕色無定形多孔性顆?;蛐≈闋?。為部分水合的二氧化硅。有吸濕性。耐熱、耐鹽酸、硫酸、硝酸等的浸漬。具高活性,可再生。溶于氫氟酸和強(qiáng)堿溶液,不溶于水
用途:生化研究。吸附劑。脫水劑。有機(jī)液體中除去水分。氣體干燥劑。殺蟲劑
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