參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013562
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4Multi-class antibodies: 48T
SMMHC/MYH11/FITC 熒光標(biāo)記平滑肌肌球蛋白重鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DHRS9 短鏈脫氫/還原家族9抗體 0.2ml
OVA/PE 熒光PE標(biāo)記雞卵白蛋白 0.1ml
LCA5 致盲基因LCA5蛋白抗體 0.2ml
土霉檢測試劑盒 98孔/盒 動(dòng)物組織/產(chǎn)/蜂蜜/奶
SMMHC/MYH11/FITC 熒光標(biāo)記平滑肌肌球蛋白重鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅氧合2Multi-class antibodies: 48T
NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾α10抗體 0.2ml
GP-BB(Mouse Glycogen phosphorylase BB)ELISA Kit 小鼠糖原磷化同工BB 96T
Prominin 2 造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CaMKK1 鈣調(diào)蛋白激激α抗體CaMKKα 0.1ml
NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Goat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLDC 甘脫羧P蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB2 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族2抗體 0.2ml
HSP-105/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白HSP105抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG 兔抗小鼠IgG 1mg
phospho-PKC delta (Thr505)/FITC 熒光標(biāo)記磷化蛋白激C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒50次普通變形桿菌種屬: Proteus│vulgaris提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 外斐氏實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
湖南類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│hunanensis sp. nov.分離基物: 雜交稻種子提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
小單孢菌種屬: Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
KI-67抗原(Ki-67)ELISA試劑盒甲咪唑煙 分析標(biāo)準(zhǔn)品納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形二甲酮腙(>98%,BR)
Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成抗體(Jo1/HRS)ELISA試劑盒甲基立枯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%納米二氧化鈦 99.8%,60nm,銳鈦,親甲芐酯(>99%,BR)
IV形膠原蛋白α3鏈(COL4A3)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 5mg/ml,測含量較高樣品。 2瓶500毫升為烯硫 99%三丁基芐基溴化銨(>99%,BR)
IPO-38蛋白(IPO38)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 3mg/ml,測常規(guī)樣品烯基基二硫 90%三丁基芐基化銨(>99%,BR)
Igγ3鏈C區(qū)(IGHG3)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 2mg/ml,測含量較低樣品2-乙酰吡咯 99%芐基三乙基化銨(>98%,BR)
ICOS配體(ICOSLG)ELISA試劑盒雙組份無吡啶滴定劑 1mg/ml,測含量較低樣品2-乙?;?2-噻唑啉 97%4,4'-聯(lián)二甲(>98%,BR)
ICE蛋白激活因子(IRAP)ELISA試劑盒雙組份無吡啶溶劑 用作反應(yīng)介質(zhì)2,3-丁二硫 98%化鉍(>98%,BR)
I 型膠原蛋白(COL I)ELISA試劑盒容量法雙組份含吡啶溶液A 3mg/1mlA+B,測定常規(guī)樣品雙 (2-甲基-3-呋喃基)二硫 98%檸檬鉍
H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 5mg/ml,測量較高樣品2,5-二甲基-2,5-二羥基-1,4-二噻 95%化鉍
G蛋白偶聯(lián)受體152(GPR152/PGR5)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 2mg/ml,測量較小樣品二糠基二硫 95%硫鉍(>98%,BR)
G蛋白偶聯(lián)受體109A(GPR109A)ELISA試劑盒單組份卡爾費(fèi)休試劑(測酮類樣 1mg/ml,測量微小樣品二糠基硫 98%式碳鉍
G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 5mg/ml,測量較高樣品二基硫 98%楊鉍
G蛋白偶聯(lián)雌受體1(GPR30)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 2mg/ml,測含量較低樣品基二硫 99%鉍粒(>99%,BR)
G蛋白偶合受體44(GPR44/CRTH2/DL1R)ELISA試劑盒單組份含吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑 1mg/ml,測含量微小樣品4,5-二甲基-2-異丁基噻唑啉 97%β-萘氧乙鈉(植物級)
GTP活化蛋白(GAP)ELISA試劑盒單組份滴定用溶劑(不含甲) 分≤0.01%,用作反應(yīng)介質(zhì)2,5-二甲基-3-(2H)呋喃酮 98%Brij 56
GTPNRas(NRAS)ELISA試劑盒單組份油類測定用溶劑 分≤0.01%,測礦物油2,5-二甲基-3-呋喃硫 1135921溴(3%)