詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:黑麥草腥黑粉菌PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013406
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂性蛋白Multi-class antibodies: 48T
Synaptopodin 突觸極蛋白synaptopodin抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat human IgM/Cy5 Cy5標記的羊抗人IgM 0.1ml
Smad7(Human Mothers against decapentaplegic homolog 7) ELISA Kit 人Smad7 96T
NPY5R 神經(jīng)肽Y受體5抗體 0.2ml
Brn-2 大腦蛋白2抗體 0.2ml
Synaptopodin 突觸極蛋白synaptopodin抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Col IV (Human Collagen Type IV ) ELISA KIT 人Ⅳ型膠原Multi-class antibodies: 48T
IFABP 小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAP3K9 原活化蛋白激3K9抗體 0.2ml
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit 人Rho家族GTP1 96T
RAB21 G蛋白家族RAB21蛋白抗體 0.2ml
C2orf84 2號染色體開放閱讀框84抗體 0.2ml
IFABP 小腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
GKAP1 G激錨定蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin V 重組膜粘連蛋白5抗體 0.1ml
IL-23R/FITC 熒光標記抗白介-23受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗人IgG 0.1ml
RICTOR/FITC 熒光標記雷帕霉靶蛋白復(fù)合體2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
黑麥草腥黑粉菌PCR試劑盒蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
玫瑰暗黃鏈霉菌種屬: Streptomyces│roseofulvus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Amycolatopsis keratiniphila subsp. keratiniphila種屬: Amycolatopsis│keratiniphila subsp. keratiniphila提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
問號狀鉤端螺旋體種屬: Leptospira│interrogans提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分型 Pyrojenes robinsoni培養(yǎng)基: CM0114生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA試劑盒原卟啉 95%2--5-甲 99%腺(標準品)
胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒聚烯 平均分子量M.W ~1,800 2-二甲酮 99%琥乙紅霉
胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒聚烯 平均分子量M.W ~450,0004--4'-羥基二甲酮 98%尼索地平
胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒液體石蠟 色譜固定液,80℃二 99%尼索地平(標準品)
胸苷合成(TS)ELISA試劑盒液體石蠟 分子生物學(xué)級4,4'-二二甲酮 99%布洛芬
性結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒液體石蠟 包埋級2,4-二羥基二甲酮 99%布洛芬(標準品)
性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)ELISA試劑盒正十二基 分析標準品,≥99.5% (GC)4,4'-二羥基二甲酮 98%馬來依那普利
信號識別顆??贵w(SRP)ELISA試劑盒6-正基-2-硫代尿嘧啶 分析標準品2-羥基-4-甲氧基-5-磺二甲酮 98%馬來依那普利(標準品)
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)ELISA試劑盒全氟辛 分析標準品, 用于環(huán)境分析4-羥基二甲酮 98%氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)ELISA試劑盒2,4,6-三磺 5 % (w/v) 溶液2-羥基-4-甲氧基二甲酮 99%氟尿嘧啶,5-氟脲嘧啶,5-氟尿嘧啶(標準品)
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)ELISA試劑盒2-基硫 96%4-甲基二甲酮 98%琥珀舒馬曲普坦
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)ELISA試劑盒姥鮫 98%4,4'-二氟二甲酮 99%琥珀舒馬曲普坦(標準品)
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)ELISA試劑盒4-(1-吡咯)甲 97%4-硝基二甲酮 99%硫鏈霉
信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)ELISA試劑盒聚乙烯,1000 分析標準品2-基并咪唑 98%硫鏈霉(標準品)
新生甲狀腺(NN-T4)ELISA試劑盒聚(4-乙烯磺-共聚-馬來)鈉鹽 摩爾比率3:1氧乙鈉 98%硫雙氫鏈霉
新生兒促甲狀腺(N-TSH)ELISA試劑盒聚(4-乙烯磺-共聚-馬來)鈉鹽 摩爾比率1:11,4-萘醌 95%雙芬鈉
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。