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剛地弓形蟲染料法熒光定量PCR試劑盒50次

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更新時間:2022-04-14 11:29:49瀏覽次數(shù):342

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013473 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
剛地弓形蟲染料法熒光定量PCR試劑盒50次正在出售的產(chǎn)品:文多靈CAS:2182-14-1純化線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
156-54-7丁酸鈉活體細胞線粒體跟蹤試劑盒
人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒活體細胞線粒體長期跟蹤試劑盒
2018-61-3N-乙酰-L-苯丙氨酸全血線粒體DNA萃取試劑盒

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

剛地弓形蟲染料法熒光定量PCR試劑盒50次

50次

FS-P013473

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

Human desmin,Des ELISA Kit 人結(jié)蛋白Multi-class antibodies: 48T

 SSB/La 干燥癥SSB/La抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgM/Bio 生物標記的羊抗人IgM  0.1ml

Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關磷脂A2 96T

Proprotein Convertase 2 神經(jīng)轉(zhuǎn)化2抗體 0.1ml

BAFF TNF家族B細胞激活因子抗體 0.1ml

 SSB/La 干燥癥SSB/La抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit 人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2Multi-class antibodies: 48T

 PCX/PODXL 足細胞特異蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh HMGCS2 三羥基基A合成2抗體  0.2ml

Col II ELISA Kit 大鼠Ⅱ型膠原 96T

PSMD10 蛋白調(diào)解因子10抗體 0.2ml

C1orf83 1號染色體開放閱讀框83抗體 0.2ml

 PCX/PODXL 足細胞特異蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  pig IgG/FITC FITC標記的兔抗豬IgG 0.3ml

GALNT14 GalNAc-T14抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Apoptosis enhancing nuclease 細胞凋亡增強核抗體  0.2ml

 Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) /FITC 熒光標記磷化核因子κB激alpha/beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  MG IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗長爪沙鼠IgG  0.1ml

 ProADM (Adrenomedullin)-N20 peptide /FITC 熒光標記腎上腺髓質(zhì)前提N端20肽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
剛地弓形蟲染料法熒光定量PCR試劑盒50次蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

紫紅曲霉種屬: Monascus│purpureus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: Type strain of M. albidus var. glaber培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法

米曲霉種屬: Aspergillus│oryzae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)α-淀粉。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法

齒孢青霉種屬: Penicillium│daleae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA試劑盒鹽副品紅 Indicator碳鋇 SP甲氨蝶呤二鈉鹽 (標準品)

人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒二磺鋇 CP碳鋇 99.95% metals basis鹽沙氟沙星;鹽沙拉沙星

人抗皮膚抗體(ASA)ELISA試劑盒二磺鋇 98%碳鋇 ACS鹽沙氟沙星;鹽沙拉沙星(標準品)

人抗抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒雙環(huán)己酮草酰二腙 98.0%碳鋇 99.8%,D50 0.5-1.5μm甲硫二馬尼/二馬尼甲硫鹽

人抗受體(ATR)ELISA試劑盒縮二脲 AR,98%碳鈣 AR,99%甲硫二馬尼(標準品)

人抗III(AT III)ELISA試劑盒甲酚紅 Indicator碳鈣 99.5%,0.8μm,電子級TBTU,O-并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟酯

人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒甲酚紅 AR碳鍶 AR,99%吡-2-羧,吡單羧

人抗Ⅲ(ATⅢ)ELISA試劑盒甲酚紅 98%碳鍶 CP,97%異丁基

人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒鉻天青S AR碳鍶 SP達格列;達格列凈

人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒變色鈉 ACS碳鍶 電子級,0.3~0.5um,99.5%甘草查而酮 A(標準品)

人抗內(nèi)皮抗體(AECA)ELISA試劑盒變色鈉 98%碳鍶 99.95% metals basis三卡班

人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒變色鈉 AR碳鍶 99.995% metals basis吩;法齊明

人抗苗勒管(AMH)ELISA試劑盒鈣羧指示劑 AR三氧化二鉻 CP,98.5%法齊明(標準品)

人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒鈣羧指示劑 Indicator草鐵(II) CP,98%聚乙烯吡咯酮,PVP-K15

人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒變色 ACS,99%草鐵(II) AR,99%聚乙烯吡咯酮,PVP-K17

人抗脂酰絲氨抗體(APSA)ELISA試劑盒鎘試劑 AR一氧化錳 99%聚乙烯吡咯酮,PVP-K25


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