詳細(xì)介紹
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013407 |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體Multi-class antibodies: 48T
Synapsin II 神經(jīng)突觸2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
SP(Mouse Substance P) ELISA Kit 小鼠P物質(zhì) 96T
NEDD4 神經(jīng)前體細(xì)胞發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體 0.2ml
Beta tubulin cofactor D 微管蛋白β輔助因子D抗體 0.2ml
Synapsin II 神經(jīng)突觸2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Human Sa-antibody ELISA Kit 人抗Sa抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-13Ra2 白細(xì)胞介-13受體a2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LYVE-1 管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體 0.1ml
GSH-Px kit(human) 人谷胱甘肽過(guò)氧化物elisa試劑盒 96T
RAB20 ras癌基因家族RAB20抗體 0.2ml
CCK8 膽囊收縮8抗體 0.1ml
IL-13Ra2 白細(xì)胞介-13受體a2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.3ml
GIYD2 DNA修復(fù)蛋白GIYD2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Annexin VI 膜粘連蛋白6抗體 0.1ml
IL-23/FITC 熒光標(biāo)記白介-23抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 熒光標(biāo)記衰老標(biāo)記蛋白30抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
苜蓿黃萎病菌PCR試劑盒大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 312生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
藤黃色鏈霉菌種屬: Streptomycesluteocolor安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃
銅綠假單胞菌種屬: Pseudomonas│aeruginosa提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
傷寒沙門(mén)氏菌種屬: Salmonella│typhi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi F2 9,12,Vi d -培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
新喋呤(NEOP)ELISA試劑盒藍(lán)VF IndicatorCelite® 硅藻土545 助濾劑,碳鈉處理,通量煅燒雙芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(ZnT6)ELISA試劑盒乙酯 99%Celite 硅藻土,洗 用于總膳食纖維含量分析, TDF-100A加巴噴丁
鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(ZnT4)ELISA試劑盒撲草凈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%助濾劑,洗,碳鈉處理,通量煅燒加巴噴?。?biāo)準(zhǔn)品)
鋅指蛋白RIZ(PRDM2)ELISA試劑盒撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6% 助濾劑,通量煅燒(filter aid, flux calcined)多潘立酮
鋅指蛋白644(ZNF644)ELISA試劑盒撲草凈標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%1-癸烯 95%多潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
鋅α2糖蛋白(AZGP1)ELISA試劑盒撲草凈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%二正辛 97%帕潘立酮
心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒聚乙二二烯酯 平均分子量 ~258 1-己烯 99%帕潘立酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒聚乙二二烯酯 平均分子量~5751-己烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)硝柳
心納(ANF)ELISA試劑盒聚乙二二烯酯 平均分子量 ~700 1-己烯 97%硝柳(標(biāo)準(zhǔn)品)
心肌營(yíng)養(yǎng)1(CT-1)ELISA試劑盒聚乙二甲基烯酯 平均分子量 ~3001-己烯 Standard for GC環(huán)沙星
心肌膜B1-AR(B1-AR)ELISA試劑盒聚乙二甲基烯酯 平均分子量 ~475α-乙烯 99%環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒聚乙二甲基烯酯 平均分子量~9501-辛烯 98%泛昔洛韋
心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %溶液,800-1000 cP (25 °C) 2,4,4-基-1-戊烯 98%泛昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒鹽巴馬汀 97% 2,3-二-1,4-萘醌 98%氟達(dá)拉濱酯
心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)ELISA試劑盒N-基-1-萘 98%2,3-二-1,4-萘醌 分析標(biāo)準(zhǔn)品噴昔洛韋
心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒異硫酯 99%, 蛋白測(cè)序級(jí)對(duì)氨基 98%伊曲康唑