詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:棉花黃萎病菌PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013408
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
HRH4/GPCR105/FITC 熒光標(biāo)記組織胺H4受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Synapsin II /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)突觸2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADK/AK 腺苷激抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
GABRA4 G基丁A型受體α4/GABAA Rα4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
Synapsin II /FITC 熒光標(biāo)記神經(jīng)突觸2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Q-Ab(Human Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體Multi-class antibodies: 48T
IL-17 白介-17抗體(人)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LYL1 細(xì)胞性白血病相關(guān)序列1抗體 0.2ml
LDLR(Human very low density lipoprotein receptor) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受體 96T
RAB2 ras癌基因家族Rab2抗體 0.2ml
Crk p38 Crk p38抗體 0.2ml
IL-17 白介-17抗體(人)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.3ml
GIDRP88 生長抑制和分化相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANP 心鈉抗體 0.1ml
IL-22BP/IL22RA2/FITC 熒光標(biāo)記白介22受體結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
RelB /FITC 熒光標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
棉花黃萎病菌PCR試劑盒榆耳種屬: Gloeostereum│incarnatum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
假絲酵母種屬: Candida│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
變灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│cinereus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0039生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
米根霉種屬: Rhizopus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
協(xié)同激分子受體(CMR)ELISA試劑盒 分析標(biāo)準(zhǔn)品5-氨基鄰甲酚 97%伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒聚乙烯硫鹽 平均分子量 Mw ~170,0002-氨基-4-二基 97%氟康唑
小而密低密度脂蛋白(sLDL)ELISA試劑盒5-酰核糖-1-焦鈉鹽 80%2-氨基-2'-甲基二基 97%氟康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品AE-活性酯 97%鹽齊拉西酮
小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒無亞硫 CP,98.0%二硫化二并噻唑 98%鹽齊拉西酮(標(biāo)準(zhǔn)品)
小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒 Standard for GC, ≥99.5% (GC)5-硝基-2-酚 98%草依地普侖/草艾司西
相撲結(jié)合UBC9(UBE2I/UBC9/UBCE9)ELISA試劑盒仲班 99%2-氧基 99%草依地普侖/草艾司普蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)
腺相關(guān)病(AAV)ELISA試劑盒菲啰 97%4-氨基二 98%消旋卡多曲
腺苷脫氨(ADA)ELISA試劑盒P1,P5-二(腺苷5′)五五鈉鹽 96%1,8-二氨基萘 97%消旋卡多曲(標(biāo)準(zhǔn)品)
腺苷環(huán)化1(AC-1)ELISA試劑盒一甲乙酯 99%1,5-二硝基萘 97%乙酰螺旋霉
腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)ELISA試劑盒1-(4-吡啶基)哌 97%鹽聯(lián) AR,99.0%尼羅替尼
腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)ELISA試劑盒鄰-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥鹽鹽 99%,用于GC鹽乙二 AR,99%尼羅替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)
腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒鄰-(2,3,4,5,6-五氟芐基)羥鹽鹽 98%鹽乙二 CP,98.0%螺旋霉
線粒體肽蛋氨亞砜還原(MSRA)ELISA試劑盒DL-3-基-2-羥 ≥98.0%赤 AR,98.5%螺旋霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
銜接蛋白活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒DL(±)-3-氨基-3-基 98%黃 AR(劇品)螺內(nèi)酯
?;囸I(AG)ELISA試劑盒2-基丁酰 98%黃 CP(劇品)螺內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)