詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013388 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
ANX- V ELISA Kit 大鼠膜聯(lián)蛋白ⅤMulti-class antibodies: 48T
T Beta 10 胸腺β10抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GDF-1 生長、分化因子1抗體 0.1ml
Alpha-EP(Human Alpha-Endomorphin) ELISA Kit 人α-內(nèi)肽 96T
NQO1 醌氧化還原抗體 0.1ml
GEF H1 Rho鳥苷交換因子2抗體 0.2ml
T Beta 10 胸腺β10抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
TNFsR- II (Human Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 人壞死因子可溶性受體ⅡMulti-class antibodies: 48T
GLP-1 (7-36) 胰高血糖樣肽-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit 人心型脂肪結(jié)合蛋白 96T
RAB6A G蛋白結(jié)合蛋白RAB6A抗體 0.2ml
CASC3 易感候選基因3抗體 0.1ml
GLP-1 (7-36) 胰高血糖樣肽-1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GNG2 G蛋白γ2抗體/鳥核苷結(jié)合蛋白γ2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKS1A 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體 0.2ml
Inhibin Beta B /FITC 熒光標(biāo)記抑制βB抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG whole serum 兔抗人IgG抗血清 1ml
RPLP0/FITC 熒光標(biāo)記性核糖體磷蛋白大亞基P0抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
瓜類細(xì)菌性果斑病菌PCR試劑盒施氏假單胞菌種屬: Pseudomonas│stutzeri提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
木糖氧化產(chǎn)菌反硝化亞種種屬: Achromobacter│denitrificans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
太湖新鞘氨醇菌種屬: Novosphingobium│taihuense分離基物: 沉積物/湖泊沉淀物提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒色標(biāo)GStandard for GC,≥99.5% (GC)異香草 98%甲雌二
載脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA試劑盒二基硅 98%丁甲硫酯 98%甲雌二(標(biāo)準(zhǔn)品)
載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒3,4-二氟二甲酮 98%甲硫 99%雌三
載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒2,4-二肼 ~0.005 M in ethanol, for TLC 吡 99%雌三(標(biāo)準(zhǔn)品)
載脂蛋白A1(apo A1)ELISA試劑盒3,3'-二甲基聯(lián)萘 97%吡 98%*泊甙(進(jìn)分)
運(yùn)甲狀腺蛋白/前白蛋白(TTR)ELISA試劑盒2.4-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)2,3,5-基吡 99%*泊甙
孕烯酮(PREG)ELISA試劑盒O,O-二乙基硫代鹽 98%2,3,5-基吡 ≥99%, FCC, Kosher, FG *泊甙(標(biāo)準(zhǔn)品)
孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒1-(3-二甲氨基基)-3-乙基碳二亞 97%異戊乙酯 99%依西美坦(企標(biāo))
孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒2′-脫氧胞苷-5′-二鈉鹽 98%異戊乙酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG醋艾塞那肽
孕酮(PROG)ELISA試劑盒2′-脫氧腺苷-5′-單 98%(±)-2-甲基-1-丁 98%非那雄
孕誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)ELISA試劑盒2,2-二基乙 99%3,4-二甲氧基甲 99%非那雄(標(biāo)準(zhǔn)品)
孕/孕酮(PROG)ELISA試劑盒3,5-二氟芐 97%2',6'二-3'-氟乙酮 97%氟羅沙星
遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1(FUBP1)ELISA試劑盒4,4'-二氨基二甲酮 98%2,4-二-3-硝基-5-氟甲 97%氟羅沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
原纖維蛋白-1(FBN1)ELISA試劑盒3-羥基-D-酪氨 98%4-氟乙酮 98%氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶
原鈣黏1(PCDH1)ELISA試劑盒1,4-二氫-2-甲 95%對氟甲 98%氟胞嘧啶/5-氟胞嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)
魚精蛋白1(PRM1)ELISA試劑盒6,8-二羥基芘-1,3-二磺二鈉鹽 97%4'-乙酮 99%氟比洛芬(國產(chǎn))
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。