中文名稱:細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)
英文名稱:Hoechst Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100次
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。細胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮。所以Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞的細胞核呈正常的藍色,而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發(fā)白。 |
試劑盒特點:
1. 只需25分鐘即可完成細胞凋亡檢測的整個過程。
2. 本試劑盒提供了固定液,染色液,及抗熒光淬滅封片液。
3. 本試劑盒對貼壁細胞,懸浮細胞和組織切片均適用。
4. 足夠檢測100個樣品。
試劑盒組份:
固定液————————————50ml
Hoechst 33258染色液 —————50ml
抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
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腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)elisa試劑盒英文名稱:TRAIL-R1 ELISA Kit磷酸化乙酰A羧化酶抗體包裝25g
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細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)組蛋白A(小牛胸腺)
英文名稱:Histones,dried(Calf thymus)
產(chǎn)品規(guī)格:BR
包裝:250毫克/1克
CAS號:9064-47-5
級別:BR
產(chǎn)品描述:An ethanol dried powder.Unfractionated mixture of histones.Histones are characterized by gel electrophoresis and solubility.Soluble in physiological saline,phosphate buffered saline(PBS)pH7.1,or water when pHis adjusted to neutural.
性狀:粉末
用途:生化研究。一般認為其作為結(jié)構(gòu)支持體的作用比其基因調(diào)節(jié)作用更為重要。
保存:2~8°C
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)