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詳細介紹
細胞詳述
根據(jù)不同來源及分化階段，干細胞可分為胚胎干細胞和成體干細胞胚胎干細胞具有分化為多種不同組織的能力，但在倫理上存在爭議。成體干細胞因其來源廣泛、增殖能力強等特點，現(xiàn)已成為組織工程學研究的種子細胞。其中，脂肪干細胞作為組織工程修復的種子細胞，因其具有來源豐富、取材容易、增殖能力強等優(yōu)點，正受到越來越多的關注。
脂肪干細胞形態(tài)類似成纖維細胞，具有較強的增殖能力。在一定的誘導條件下，可分化為脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞、心肌細胞、上皮細胞等，具有多向分化潛能。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
注意事項： 收到細胞后第一次傳代建議1：2傳代，充液培養(yǎng)基是維持培養(yǎng)基，不能用來培養(yǎng)細胞。
細胞特性
1) 組織來源于實驗動物的正常脂肪組織。
2) 細胞鑒定：CD44免疫熒光染色為陽性，CD45免疫熒光染色為陰性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
一、細胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號 |
小鼠附睪脂肪干細胞永生化 | 1×106 | A01X1216 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔乳腺成纖維細胞 | A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基 |
DYDC1蛋白抗體 | AF555標記的NKD2蛋白抗體 |
RM-1+LUC小鼠前列腺癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的肌動蛋白α1抗體 |
SDOW-17小鼠雜交瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的水通道蛋白4單克隆抗體 |
SDOW-17小鼠雜交瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的關節(jié)炎相關基因抗體 |
Sp2/0小鼠骨髓瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的磷化雷帕霉靶蛋白抗體 |
Sp2/0小鼠骨髓瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的CD28抗體 |
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的21號染色體開放閱讀框66抗體 |
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的真核翻譯起始因子3F抗體 |
STC-1小鼠小腸內(nèi)分泌細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的細胞色B還原1抗體 |
STC-1小鼠小腸內(nèi)分泌細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的銅藍蛋白抗體 |
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠附睪脂肪干細胞永生化AF555標記的結腸癌相關蛋白MIC1抗體 |
SV40-MES-13小鼠腎小球系膜細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的白介11抗體 |
SVEC4-10小鼠淋巴結血管上皮樣 細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的G蛋白P21 RAC2抗體 |
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞專用培養(yǎng)基 | AF555標記的雌激受體β抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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