進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)到底該不該選擇做內(nèi)參
內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的試驗(yàn)環(huán)境，比如某些細(xì)胞中，由于組織缺氧、糖尿病等因素會(huì)導(dǎo)致GAPDH的表達(dá)增高，內(nèi)參抗體種類很多，比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等，那么針對(duì)自己的實(shí)驗(yàn)，我們?cè)撊绾芜x擇呢?選擇內(nèi)參抗體時(shí)，應(yīng)該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應(yīng)該保證目的蛋白與內(nèi)參蛋白分子量相差5KD以上。
1、哺乳動(dòng)物的組織或者細(xì)胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。
2、植物來(lái)源實(shí)驗(yàn)樣本，則可以選擇plant actin、Rubisco等。
就一般的蛋白檢測(cè)來(lái)說(shuō)，β-actin、β-Tubulin抗體等就可以了，而針對(duì)于核蛋白的定量，特別是樣本蛋白就是核蛋白時(shí)，選擇恰當(dāng)?shù)暮说鞍變?nèi)參則更能體現(xiàn)內(nèi)部參照的價(jià)值。常用的核內(nèi)參抗體有Lamin A、Lamin B、Histone H3，除此之外，其它常見的核蛋白內(nèi)參還有PCNA、K70、K80等，在一些文獻(xiàn)報(bào)道中，Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而對(duì)于膜蛋白檢測(cè)，常用的內(nèi)參抗體為Na,K ATPase。對(duì)于線粒體蛋白的檢測(cè)，常用VDAC1和COX IV作為內(nèi)參抗體。
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