犬Ⅳ型膠原（Col Ⅳ）檢測(cè)試劑盒樣品收集方法

 

十二月，我想起那年周末我常常出現(xiàn)在阿纖家，在寒冷的天氣，我?guī)е弊樱髦鴩?，拿著討厭的?shù)學(xué)卷子聽(tīng)阿纖耐心的講，講得我自己都覺(jué)得不好意思再問(wèn)一遍。十二月，我記得我陪著一個(gè)女孩在操場(chǎng)哭了一個(gè)晚自習(xí)，她的眼淚，浸濕我的圍巾，她倔強(qiáng)的說(shuō)不要上課。我們傻傻的站在那里，不知道是那年的風(fēng)太大還是那時(shí)候的操場(chǎng)好冷，我覺(jué)得自己已經(jīng)那木了站在那里。接下來(lái)介紹 犬Ⅳ型膠原（Col Ⅳ）檢測(cè)試劑盒樣品收集方法。

 

 

樣品收集:

 

1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管。

 

2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)。避免使用溶血，高血脂樣品。

 

3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

 

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。

 

5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)

 

6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

 

7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃，若不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個(gè)月內(nèi)檢測(cè))，或-80℃（6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)），避免反復(fù)凍融。

 

8. 如果您的樣品中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)）。