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技術(shù)文章

進(jìn)口elisa試劑盒操作步驟與保存

閱讀:413          發(fā)布時(shí)間:2020-10-21

進(jìn)口elisa試劑盒處理和保存:

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中。

2、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集)。

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心5min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。 請注意指標(biāo)說明書上對(duì)于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖?,建議使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。

進(jìn)口elisa試劑盒注意事項(xiàng):制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。

進(jìn)口elisa試劑盒操作步驟:

1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗(yàn)所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)壓 實(shí)自封條,密封口袋,放回4℃。

2.空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液,其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品(100ul/孔),用封板膠紙封

住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育90分鐘。

3.提前20分鐘準(zhǔn)備生物素化抗體工作液。

4.洗板5次。

5.空白孔加生物素化抗體稀釋液,其余孔加入生物素化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育60分鐘。

6.提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。

7.洗板5次。

8.空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,其余進(jìn)口elisa試劑盒孔加入酶結(jié)合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘。

9.打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

10.洗板5次。

11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘。

12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值(3分鐘內(nèi))。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。

13.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束。 

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