小鼠elisa試劑盒原理：

 本小鼠elisa試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體，則將與酶標板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。

小鼠elisa試劑盒操作注意：

1.不同的試劑盒因工藝和操作方法略有不同，務必按照所用人Opiorphin蛋白(OPI)ELISA試劑盒說明書嚴格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.

2.若不同批號小鼠elisa試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

3.反應時間的誤差，做大量標本時，一孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。

4.臨界值附近標本波動為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復檢。

5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響，建議校對加樣器。

小鼠elisa試劑盒樣本處理及要求：

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影響*后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。