ELISA實(shí)驗(yàn)間接法試劑及試劑配制：

1. 抗原及酶標(biāo)記抗體
①抗原： IgG

②酶標(biāo)抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP

2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。

3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。

4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。

5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9

6. 底物溶液（4甲基酰苯氨）
①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。
② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。
③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。
④底物應(yīng)用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。

7. 終止液：2mol/L H2SO4