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胎牛血清的作用及主要技術(shù)指標(biāo)
閱讀:474 發(fā)布時間:2023-7-24一般而言,胎牛血清是指懷孕5-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未wan全的胎牛心臟穿刺采血后,通過一系列工藝處理zui終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育wan 全這些因子自動消失。
胎牛血清具有極為重要的作用,其包括:
1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
胎牛血清是品質(zhì)的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分zui少。
胎牛血清主要技術(shù)指標(biāo):
1、總蛋白含量——胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明采血的牛齡偏大,或不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能被稀釋。
2、 血紅蛋白——標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,則數(shù)值越低。
3、 pH值——標(biāo)準(zhǔn)為6.5-8.5,pH值的高低,對于血清品質(zhì)而言沒有直接的影響。
4、微生物——包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。目前,細(xì)菌、霉菌等微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1μm三重過濾,大多也能清除。而大腸桿菌主要是在生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,無法過濾,一旦侵染則很難徹di清除,并會消耗血清中的營養(yǎng)物質(zhì),對血清品質(zhì)影響極大。此外,各類病原體,即便農(nóng)業(yè)部允許進(jìn)口的產(chǎn)地,也需要做系列檢測,保證實(shí)驗(yàn)的安全性。
5、內(nèi)毒素——內(nèi)毒素控制在10EU/ml以內(nèi)是符合的,過高的內(nèi)毒素,代表血清生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)不過關(guān),對細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)也有較大的影響。
6、免疫球蛋白——免疫球蛋白的數(shù)值能wan 全體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,一部分采用新生牛來替代胎牛,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,一般不含IgM,IgG的含量也較低。