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培養(yǎng)基滅菌的原理和方法
閱讀:322 發(fā)布時(shí)間:2024-2-5所謂滅菌就是殺死一切微生物,包括微生物的營(yíng)養(yǎng)體和芽孢,這一概念不同于消毒。滅菌的方法很多,在實(shí)驗(yàn)室可以使用干熱滅菌、對(duì)于環(huán)境可以使用化學(xué)試劑滅菌,但化學(xué)試劑的滅菌方法有很大的限制。在工業(yè)生產(chǎn)中,對(duì)于培養(yǎng)基、管道、設(shè)備的滅菌,通常采用蒸汽加熱到一定的溫度,并保溫一段時(shí)間的滅菌方法,稱之為濕熱滅菌。濕熱滅菌的顯著優(yōu)點(diǎn)是:使用方便,無(wú)污染,而且其冷凝水可以直接冷凝在培養(yǎng)基中,也可以通過(guò)管道排出。下面介紹滅菌方法:
一、化學(xué)物質(zhì)滅菌
原理:藥物與微生物細(xì)胞中的成分反應(yīng),使蛋白質(zhì)變性酶失活。
使用范圍:器皿、雙手和實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌室的環(huán)境滅菌,不能用于培養(yǎng)基滅菌。
常用的滅菌劑:
化學(xué)物質(zhì)名稱 有效濃度 化學(xué)物質(zhì)名稱 有效濃度
新潔爾滅 0.25% 甲醛 37%
杜滅 0.25% 戊二醛 2%
高錳酸鉀 0.1%-0.25% 苯酚 0.1%-0.15%
漂白粉 5% 過(guò)氧乙酸 0.02%-0.2%
酒精 75% 焦碳酸二乙酯 0.01%-0.1%
煤酚皂(來(lái)蘇爾) 1%—5%
二、輻射滅菌
輻射滅菌的原理是利用高能量的電磁輻射與菌體核酸的光化學(xué)反應(yīng)造成菌體死亡。常用的有紫外線、X射線和γ射線。用于室內(nèi)空氣及器皿表面滅菌。
三、干熱滅菌
滅菌原理是利用高溫對(duì)微生物有氧化、蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃縮作用而殺滅微生物。常用灼燒和電熱箱加熱,140-180℃ 1-2小時(shí) 。適于對(duì)玻璃及金屬用具及沙土管滅菌。
四、濕熱滅菌
滅菌原理是直接用蒸汽滅菌,蒸汽在冷凝時(shí)能釋放出大量潛熱,蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞菌體蛋白和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡。水煮常壓滅菌:100℃?;蝻柡驼羝麥缇阂话?21℃,30分鐘。適合培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備滅菌。
五、過(guò)濾除菌
除菌原理是利用微生物不能透過(guò)濾膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔徑濾膜,用于壓縮空氣、酶溶液及其他不耐熱化合物溶液除菌。