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大鼠elisa試劑盒磷酸化蛋白質組分析方法研究取得新進展
閱讀:119 發(fā)布時間:2018-8-8提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 4.1KB |
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大鼠elisa試劑盒磷酸化蛋白質組分析方法研究取得新進展
近日,中國科學院大連化學物理研究所生物分離分析新材料與新技術研究組(1809組)鄒漢法、葉明亮等在磷酸化蛋白質組分析新方法研究方面取得新進展。該團隊與加拿大西安大略大學教授李順成研究團隊利用生物分子之間的特異性識別作用建立了一種非抗體的酪氨酸磷酸化肽段富集新方法,顯著提高了酪氨酸磷酸化蛋白質組的分析覆蓋率和靈敏度,相關研究成果以Article形式發(fā)表在《自然-化學生物學》(Nature Chemical Biology doi:10.1038/nchembio.2178)上。
酪氨酸激酶在細胞信號轉導過程中具有重要的調控作用,其異?;罨c眾多疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關,因此是眾多藥物分子的靶標蛋白。由于受到高豐度絲氨酸/蘇氨酸磷酸化的嚴重干擾,常規(guī)的磷酸肽富集策略對酪氨酸磷酸肽的富集效果較差。到目前為止,基于抗體的酪氨酸磷酸化蛋白質富集策略是行之有效的手段,但是該方法存在特異性差、重現(xiàn)性低、價格昂貴等缺點。SH2是生物體用于識別酪氨酸磷酸化的結構域,但是天然的SH2親和力弱,不能有效富集酪氨酸磷酸肽。李順成此前通過突變結合區(qū)的三個殘基建立SH2超親體,該SH2突變體與酪氨酸磷酸肽的親和力提高了2-3個數(shù)量級。大連化物所1809組此次發(fā)展的技術則通過聯(lián)合使用SH2超親體和該組前期開發(fā)的固定鈦離子親和色譜(Ti(IV)-IMAC)實現(xiàn)了酪氨酸磷酸化肽段的高特異性富集。系統(tǒng)對比表明該方法對酪氨酸磷酸化肽段的富集能力優(yōu)于常見的多種商品化酪氨酸磷酸化抗體,且成本低廉。將該技術應用于9個細胞系酪氨酸磷酸化蛋白質組的分析,鑒定到10,030個高可信的酪氨酸磷酸化位點,其中36%的位點是鑒定得到,使酪氨酸磷酸化蛋白質組學的分析達到了一個新的深度和廣度。酪氨酸磷酸化蛋白質組學數(shù)據(jù)可以揭示不同腫瘤細胞系中酪氨酸激酶的活化情況,對于指導用藥、促進疾病的治療具有重要意義。
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